Libérez les performances maximales de séparation de votre colonne à noyau solide.

Points forts du webinaire | Comprendre l'impact de la dispersion du système sur les performances de séparation

Bonjour, je suis Jonathan E. Turner, responsable du marketing produit pour les gammes de colonnes ACQUITY® UPLC® et CORTECS® chez Waters Corporation. J'ai récemment organisé un webinaire sur les changements survenus au cours des dix dernières années et les améliorations substantielles apportées aux colonnes chromatographiques et aux instruments qui ont permis des séparations plus rapides et plus efficaces. La colonne de configuration 4,6 x 150 mm remplie de particules de 5 µm, autrefois courante, a été progressivement remplacée par des particules à noyau solide plus petites, emballées dans des colonnes de configuration plus petite. Pour optimiser les performances de ces particules à noyau solide très efficaces, il faut comprendre l'impact de la dispersion des instruments sur la séparation chromatographique.

Si vous l'avez manqué, regarder le webinaire à la demande.

Nous avons eu beaucoup de bonnes questions. Voici quelques-uns des points saillants de notre séance de questions-réponses :

• D'après votre expérience, qu'est-ce qui est le plus important, la dispersion pré-colonne ou post-colonne ?
  En général, pour les séparations isocratiques, les deux ont un impact similaire sur les performances chromatographiques. En particulier, pour les séparations par gradient, la dispersion post-colonne a tendance à avoir un impact plus important.
• Que peut-on faire pour minimiser la dispersion du système dans un système HPLC ?
  L'impact le plus important peut être obtenu en utilisant des segments plus courts de tubes à faible diamètre intérieur en pré-colonne et en post-colonne. La sélection d'une cellule d'écoulement à faible volume appropriée sera également utile.
• Les cellules d'écoulement à faible dispersion sont-elles plus sujettes au colmatage ?
  Non, elles ne le sont pas avec un entretien correct de votre système et de bonnes pratiques de laboratoire.
• Quelle est la dispersion du système UHPLC ACQUITY Arc ?
  Selon la configuration des instruments, 20-30 µL, lors de la mesure de la largeur d'un pic non retenu à 5 sigma.
• Quel est l'impact de la qualité des solvants sur les performances en HPLC et UPLC ?
  L'impact le plus courant des solvants de mauvaise qualité conduit à une contamination de fond dans votre détection, particulièrement en MS. Nous recommandons des solvants de haute qualité pour toutes les séparations LC.
• Recommandez-vous d'utiliser une colonne de garde pour les systèmes UPLC ?
  Oui, nous recommandons d'utiliser des pré-colonnes VanGuard pour toutes les colonnes UPLC.
• Quelle est votre expérience avec les joints de pompe et d'injecteur à une pression > 10000 psi ?
  Dans nos laboratoires, nous n'avons observé aucun problème. Nous recommandons de suivre les recommandations des fabricants en matière d'entretien et de maintenance de routine.
• What about large volume (100 µl) of water directly on 2.1mm ID 1,8 µm column?
  In general, injecting large volumes of any solvent, will lead to poor chromatographic performance. We recommend injecting volumes of <5% of the total column volume. We would also recommend that the sample diluents not be significantly stronger than the mobile phase.
• Quel serait le débit optimal pour une colonne de 2,1 x 30 mm, avec des particules de 2,5 µm, sur un système ACQUITY ?
  Tout dépend des analytes d'intérêt, de la température, de la composition de la phase mobile. Une bonne fourchette est de 0,3-0,5 ml/min.
• Comment la performance de l'effet UPLC avec des solvants visqueux comme l'IPA se compare-t-elle aux solvants courants comme l'acétonitrile ?
  Des viscosités de phase mobile plus élevées entraîneront une pression globale du système plus élevée.
• L'UPLC est-elle compatible avec la SEC ? (chromatographie d'exclusion de taille)
  Oui, nous vendons une gamme complète de produits SEC y compris ceux pour UPLC.
• Pour les échantillons filtrés, l'adsorption et la perte d'échantillon peuvent être un problème ? Surtout lorsque le volume de l'échantillon est faible.
  Vous pouvez essayer la centrifugation pour éliminer les particules dans votre injection. Ou vous pouvez utiliser un filtre pré-colonne ou une colonne de garde.

Regardez ce webinaire à la demande.

Vous pouvez également en savoir plus sur les Eaux Portefeuille LCle nouveau ACQUITY Arc System et le Colonnes corticales sur le site web de Waters.

Consultez également notre blog sur la simplification du transfert des méthodes : De nouveaux outils pour reproduire vos méthodes établies.