数据完整性的重要性 - 限制对可能被用来操纵数据的工具的访问 (第二部分)

Heather Longden

阅读时间：6分钟

测试或系统准备就绪的注入？

有用的工具可以应用于实现准确和一致的结果，但同时，在错误的手中或如果有人有这样的意图，它们也可能被用来伪造数据。你如何分辨呢？

峰值整合决定可能被无良的工作人员利用，以欺诈方式将不合格的结果操纵为合格的规范。我将在随后的博客中研究这个问题，因为这是一个非常详细的话题。

不遵守样品制备SOP（标准操作程序），少报样品重量，或不按标记配制体积瓶中的溶液，也可能造成故意伪造的结果，这些都比为满足电子记录规定而设计的色谱数据系统（CDS）中的整合参数的操作更难调查。

在我之前写的一篇关于限制工具访问的文章中，我谈到了数据完整性控制是如何发展的，以及使用现代工具的监管实验室现在面临的新风险。让我们来看看另一个棘手的问题：为确定你的色谱系统是否准备好在监管环境下运行你的样品而进行的注射。

制定了指导分析员的程序

有经验的科学家还知道，色谱分析会受到温度、湿度、甚至色谱柱历史以及流动相制备的影响，因此，一天的分析结果往往与前一天的运行情况略有不同。系统也可能只是需要时间让流动相和固定相达到化学平衡，或者让整个分离途径达到物理平衡，特别是在方法容易受温度变化影响的情况下。

因此，必须要有程序来指导分析员进行一系列的步骤，以确保系统准备好开始分析样品，而不用担心系统的适用性测试会立即失败。

分析师是否可以使用试用注射或系统准备度检查？

在受监管的色谱实验室中，人们对试管婴儿的使用有一种疯狂的担忧。这通常来自于阅读监管意见，没有关于使用中的SOP的重要细节。这不是系统准备/测试注射的实际使用，但审计师和监管机构有非常合理的担忧，即无良的工作人员可能利用这些合法的活动来掩盖旨在避免失败或可疑结果的恶劣行为。

系统准备度检查的合法使用可以通过一些程序性控制来解决。

  • SOP应该描述何时以及如何进行系统准备状态的注入。
  • 还应明确究竟什么样本将被用于系统准备就绪的注射。
  • 这些注射所产生的数据应该被安全地保存。

技术控制--只是阻止用户进行单次注射--将没有任何效果。任何希望 "预览 "样品测试的用户只需提交一个简短的序列；一个或两个注射或小瓶，足以绕过任何种类的技术控制，或从监测视图中掩盖它。

在FDA数据完整性指南草案的问题13中，可以找到使用什么溶液进行测试注射的例子。这个答案包括。"系统适用性测试应包括标准制剂或其他标准溶液的重复注射，以确定是否满足精度要求......如果实际样品被用于系统适用性测试，它应该是一个适当特征的二级标准"

鉴于该机构的这些指示，加上有关适当程序和文件的额外信息，它证实了系统准备情况检查是FDA允许的，与流行的神话相反。

在FDA和其他监管部门的观察中已经很好地描述了潜在的担忧，在FDA指南草案中也有讨论。"我们认为在测试、准备或平衡运行中使用实际样品作为伪装测试的手段是一种违规的做法......"

如前所述，多个实验室在被问及在CDS中发现的未报告的色谱样品结果时，（即在进样记录中注明或在秘密或难以找到的文件夹中发现，甚至是单独的PC或CDS解决方案），都试图将这些非官方的样品分析作为 "测试注射 "的借口。(见参考文献1、2、3。）这引起了人们对旨在测试LC或GC系统准备情况的真实测试注射的担忧，甚至质疑任何单一的注射或不属于样品集或序列的注射的合法性（尽管无论如何你更有可能在序列中做非官方的测试）。

系统准备注射是否为非官方的初步测试样本？

FDA指南草案明确允许进行系统准备或平衡注射，但仍有一个问题：你如何确定这些注射不是 对样品的非官方预试验？

现实上，我想不出有什么万无一失的方法可以做到这一点。很多传闻表明，监管机构认为你可以 "将测试注射液与真实样品叠加，你就可以看到测试注射液是否与样品相同"。然而，由于色谱法的性质，两个完全相同的溶液的注射很少是相同的。

只有当用于测试注射的溶液与样品明显不同时，这种调查才会产生任何结果。通常情况下，一个标准或可能是一个合成的样品混合物被用于系统准备情况的检查。实验室可能使用供应商的QC/检查溶液，这可能与感兴趣的样品无关。但是一个与样品如此不同的测试溶液让你对系统是否真的准备好并能够执行特定的方法信心不足。你的测试溶液与样品越接近，它们就越能表明可以进行高质量的分离。

有人提出了另外两种解决方案。

  • 在生物分析领域，某个小组建议利用 "集合 "样品进行系统准备情况检查，以便不预览任何真实的样品结果。但是，如何证明注射物真的是集合样品将是非常困难的。
  • 另一个建议是使用过期的或旧的样本，但在其中添加一种在真实样本中不存在的独特成分。这很有创意，但在工作流程上是一个重要的额外步骤，只是为了提供你无罪的证据。

了解为什么某些监管机构对试验性注入、测试性注入等有顾虑，将有助于你定义一个明确的程序，详细说明测试性注入应该如何进行，应该如何命名，以及应该准备什么解决方案来执行系统就绪性检查，以及任何定期或定期审查这个程序是否得到遵守。显然，隐藏或删除这些注入将招致监管部门的好奇心。但同样的，建议这些测试注入需要构成数据包的一部分，也同样是繁琐的，没有科学依据。

一些实验室现在包括在每个序列的开始进行系统准备注射，然而，注射的数量和准备HPLC的中间动作每天都会有所不同。你可能需要简单地等待更长的时间来进行平衡，否则可能需要根据系统准备注射来调整流动相或温度设置。

在这种情况下，将这些作为样本序列的一部分来执行是没有意义的。把这些作为单次注射可能更科学，但要明确定义它们的用途，以及程序化建议的故障排除活动（并可能记录这些），以便在系统准备就绪的注射表明系统...... "还没有准备好 "准确地执行你的分析。

 

在我的下一篇数据完整性事项博客中，我将讨论关于 自动整合、"按方法"手动重新整合和真正的手动整合的监管问题 ，因为它们可能都是确保准确和可重复的峰值整合所需的行动。


阅读Heather Longden的博客系列中的更多文章，数据完整性的重要性。

参考文献。