需要一些反向相位极性酸的缓解

长期以来，使用反相（RP）色谱条件保留极性分析物一直让科学家感到沮丧。 试图促进极性分析物与非极性反相表面之间的相互作用，往往会使最有经验的分离科学家达到崩溃的边缘。

极性酸特别提出了自己的一系列挑战，使它们在反相色谱条件下特别难以保留。 存在的电离硅醇会在固定相表面产生负电荷，从而排斥电离的负电荷酸。 科学家们可以采用一些 "变通 "的方法在反相色谱柱上保留极性酸，但这些方法往往会给他们的工作流程增加一层复杂性和潜在的变化。这里列出了一些常见的 "变通方法"，以及随之而来的问题。

通常与分析柱相关并在系统流路中发现的不锈钢，在分析极性酸时提出了另一个问题。 目标酸性基团，即含有磷酸、羧基和/或硫酸盐功能团的基团，可以与流路中的金属离子结合。 螯合试剂通常被添加到流动相中，以防止/缓解这些分析物与金属离子的相互作用，但与离子配对试剂一样，这些添加剂通常不适合质谱分析。

有没有比在反相条件下保留极地酸性化合物更好/更简单的解决方案？ 一个不会给我的工作流程增加额外步骤的解决方案？

混合模式或多模式色谱是这个问题的答案。 这些类型的固定相结合了多种分离模式，可以进行微调以分离具有不同理化性质的分析物。 将反相与阴离子交换相结合，提供了在反相条件下操作时能够保留这些具有挑战性的极性酸所需的解决方案。

在医学上使用的所有药物分子中，超过50%是以盐的形式存在。 药物通常以弱酸或弱碱的形式形成，但这种药物形式并不总是最适合溶解或吸收到你的体内。没有吸收，药物就不能产生治疗效果，所以有些形式需要有盐。许多药物也需要是水溶性的。因此，药物经常通过化学方法被制成其盐的形式，以加强药物的溶解，促进其在你的血液中的吸收，并增加其有效性。 对药物反离子的精确测定是所有药物盐类的释放测试和质量控制（QC）所必须的，以确认盐类形式的身份和活性药物成分（API）的质量平衡。

图1显示了抗组胺药物马来酸氯苯那敏在设计用于保留极性分析物的C18反相柱和混合模式RP阴离子交换柱上的保留和分离情况。 C18柱能很好地保留疏水性的碱性分析物氯苯那敏，但不能保留极性的酸性分析物马来酸盐。 马来酸盐是一种小的极性酸，在这根柱子上无法保留，并在空隙中洗脱。混合模式的RP/阴离子交换柱能很好地保留两种分析物。 即使切换洗脱顺序，氯苯那敏也通过RP相互作用被保留，而极性酸分析物马来酸盐则通过阴离子交换被保留。

为了解决酸性分析物对不锈钢的吸收损失问题，需要发明一种新技术。 MaxPeak高性能表面（HPS）旨在通过最大限度地减少分析物/表面的相互作用来提高分析物的回收率、灵敏度和可重复性。 这项技术解决了酸性分析物与不锈钢柱硬件相互作用时常见的问题，同时又不牺牲不锈钢的优点，其中一个优点是能够在更高的压力下操作。

5'单磷酸鸟苷是一种核苷酸，在RNA中作为单体使用。 富含电子的单磷酸酯官能团被吸引到与不锈钢硬件相关的电子不足的金属氧化物表面。 磷酸酯官能团和金属离子之间的相互作用导致了信号强度（面积）的损失，以及峰值不对称性的增加。 对于这些类型的酸性分析物，利用减轻分析物/表面相互作用的柱子硬件，可以大大减少面积损失，并改善分析物的峰形。

保留极性酸的挑战只在混合模式柱上。 利用反相/阴离子交换固定相来保留疏水性和极性酸是一个简单的解决方案，而这被认为是一个令人沮丧的任务。 利用MaxPeak HPS的色谱柱提供了一个额外的好处，通过大大减少分析物/表面的相互作用，增加面积并改善这些酸性化合物的峰形。

欲了解更多信息，请查看。

https://www.waters.com/waters/library.htm?locale=en_US&lid=135042697

https://www.waters.com/content/dam/waters/en/app-notes/2020/720006745/720006745-en.pdf

https://www.waters.com/waters/library.htm?locale=en_US&lid=135042507