伟大的假期和多肽生物分析有什么共同之处？

伊恩-爱德华兹

阅读时间：5分钟
ACQUITY UPLC I-Class PLUS和Xevo TQ-XS使用QuanRecovery MaxPeak HPS对普拉姆林特进行定量分析。

首先，没有人希望有一个灾难性的假期，生物分析检测也是如此！什么是好的假期？怎样才能有一个好的假期？一个理解你的预订代理人，准时的交通，一个离海滩咫尺之遥的风景房，友好的工作人员和美味的食物？

知道你是在安全的手中，每一步都不留任何机会，这对你的心态是很好的。

选择一个值得信赖的旅行社有点像投资于一个完整的多肽和蛋白质生物分析解决方案。

通常，生物分析人员会评估来自高性能三重四极杆质谱仪的数据的敏感性、准确性和精确性，以此作为测定性能的标志，但良好的样品处理、制备和分离的影响往往被忽略了。

正如本博客系列的第一部分 "我的样品去哪了？"，忽视非特异性结合对多肽和蛋白质的样品回收是灾难性的，最坏的情况是样品完全丢失。谁想在注射前就失去他们的样品？在 "丢失在容器中的样品"系列的第二部分。非特异性结合和阻断剂的影响"中，Moon强调了减轻非特异性结合的传统方法（添加载体蛋白、阻断剂和修改溶液条件......）通常不是一刀切的方法，也不太理想。

这就是为什么我们开发了带有MaxPeak高性能表面（HPS）的QuanRecovery样品瓶和样品板，以便与下游的LC-MS兼容。MaxPeak HPS是新的创新技术，旨在通过最大限度地减少可能导致样品损失的分析物/表面相互作用，提高分析物的回收率、灵敏度和重现性。

图1.使用QuanRecovery与MaxPeak（HPS）或标准聚丙烯的普拉姆林特的回收率%。

在凯特琳-邓宁的应用笔记"Development of a SPE LC-MS/MS Method Utilizing QuanRecovery Sample Plates with MaxPeak High Performance Surfaces for the Bioanalytical Quantification of Pramlintide from Serum"我们展示了使用标准聚丙烯板对分析具有挑战性的疏水性多肽的样品回收率的影响：普拉姆林肽（图1）。

所以这就是样品处理，但是样品的制备呢？那个感兴趣的多肽不会自己出现。我们通常需要一种高选择性的样品制备方法，能够从样品基质中的其他相关物种中分离出目标。但是我们从哪里开始呢？

这就是 Oasis µElution Peptide Separation Technology (PST) Method Development Plate 在优化您的样品制备方法以获得最大的选择性和回收率方面，"绿洲SPE "很有用处。通常情况下，Oasis SPE系列吸附剂中的混合模式固相萃取（SPE）吸附剂是净化和浓缩样品的最佳方式（图2）。它们同时采用离子交换和反相保留机制，提供正交的分析物分离和净化模式。辉煌!

图2.A. 使用Waters µElution PST方法开发板筛选多种SPE吸附剂（Oasis MAX和WCX），快速评估普兰林肽的回收率和基质效应。B. 通过优化方案，普兰林肽的回收率提高到75%。

Oasis 96孔板使样品能够以小体积洗脱，消除了干燥和重组的需要，但正如Kim在本博客系列的第三部分中提醒我们的，"肽和蛋白质的LC-MS定量前的样品准备"在自动进样器中储存期间，样品仍然可能丢失。 现在到了。 QuanRecovery 96 well-plates with MaxPeak HPS!

因此，希望你相信样品的处理和准备是很重要的。那么LC分离呢？你的多肽是极性的、疏水性的，还是大尺寸的？将你的多肽的理化特性与我们的多肽生物分析柱技术系列中的正确柱子相匹配，可以确保尖锐的峰和最佳分离（图3）。

肽分离的色谱柱化学
图3.肽分离的色谱柱化学。

 

在Caitlin的应用报告中，为了使用一流的ACQUITY UPLC I-Class PLUS和Xevo TQ-XS LC-MS技术获得最佳的定量性能，必须使用我们的完整解决方案来实现最终的灵敏度、准确性和精确度。

  • QuanRecovery，与LC-MS兼容的样品板，带有MaxPeak高性能表面，减轻了非特异性结合。
  • Oasis µElution多肽分离技术方法开发板促进了SPE吸附剂的快速筛选
  • ACQUITY UPLC多肽CSH柱提供了更好的选择性、高灵敏度和狭窄的峰宽
  • 一流的ACQUITY UPLC I-Class PLUS和Xevo TQ-XS，LC-MS技术，具有极高的灵敏度、准确性和精确性。
ACQUITY UPLC I-Class PLUS和Xevo TQ-XS使用QuanRecovery MaxPeak HPS对普拉姆林特进行定量分析。
图4. ACQUITY UPLC I-Class PLUS和Xevo TQ-XS使用QuanRecovery MaxPeak HPS对血清中的普兰林肽进行定量分析。

时间和资源是宝贵的。样品也是如此，并提供高质量的结果。为什么要因为样品的处理和制备受到影响而错过实现检测极限的机会呢？你不会在一个糟糕的旅行社上冒险度假，那么为什么要冒着一批失败的样品和不兑现承诺的风险。

为什么不利用Waters完整的多肽生物分析解决方案来获得最佳的LC-MS定量性能？从小分子分析到大分子分析可能是一个挑战。我们已经创建了一些很棒的教育资源，通过免费下载Oasis多肽生物分析参考卡和免费观看多肽和蛋白质生物分析训练营来提高您对大分子生物分析的熟练程度。

更多信息请访问DMPK和生物分析知识中心：waters.com/DMPK，或联系您当地的化学专家!

其他资源。

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