我应该购买哪种LC检测器?
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你可能不喜欢这个答案...
所以有一天,我和一个客户在一起,他们问我:"阿越,外面有这么多探测器!我怎么知道我需要哪一个?我怎么知道我需要哪一个?" 对此,我的回答是你们所有人都会爱恨交加的一句话:"这取决于!"
色谱仪的检测器有各种形状和大小。没有一种类型适合所有的应用,有时可能需要一个以上的检测器来对样品进行完整的分析。 光学检测器可分为两种类型。
- 选择性属性检测器,通过使用样品的独特属性来测量浓度(如紫外/可见光检测器)。
- 测量溶剂和溶质整体变化的团状物检测器
溶剂和溶质整体的变化(例如,折射率检测器)
我希望能消除由大量可用的探测器带来的一些困惑,以帮助你在哪种探测器适合你的项目上做出更有见地的决定。
那么,我应该选择哪种LC检测器?
紫外/可见光(UV/Vis)--紫外/可见光检测器有多种形式:固定波长、可变波长。 这些检测器传统上只限于一个或两个波长,正如其名称所示,它们需要具有在紫外/可见光范围内吸收的能力,通常在190-800纳米范围内。 它们往往用于常规分析,检测的波长不会改变,最常见的用法是一次只检测一个波长。 因为波长在分析过程中没有变化,所以基线噪声往往非常低。 良好的灵敏度、广泛的应用范围、优秀的线性动态范围和易用性的结合使紫外/可见光吸光度检测器成为优秀的通用检测器。 紫外/可见光检测器是行业中最常见的,其特定的功能通常使其成为市场上最便宜的检测器。
光电二极管阵列(PDA)--PDA检测器与UV/Vis检测器类似,因为它需要一个具有在UV/Visible范围内吸收的色基的样品。 与紫外/可见光检测器相比,这些检测器的明显优势是收集整个光谱,从而可以同时监测多个波长的吸光度。 光谱的收集还允许用户通过比较一个峰内的光谱来评估一个峰的同质性(又称纯度)。 评估峰的均匀性和同时监测多个波长的能力使PDA检测器对复杂样品的方法开发和分析特别有吸引力。 PDA检测器带来了很大的信息深度和数据中的额外细节。因此,这些检测器往往是所有检测器中价格最高的,直到你进入质量检测。
荧光(FLR)--当需要选择性或比其他检测器能提供的更多灵敏度时,通常会选择FLR检测器。 选择这种检测器时,最重要的一点是你想分析的样品必须发荧光,或者你必须用荧光剂衍生样品。 FLR检测器的理想属性包括对某些化合物类别的特异性和高灵敏度。 FLR检测器的价格往往高于UV/Vis检测器,因为检测器需要两样东西,但你不应该期望支付两倍于UV/Vis检测器的费用。常见用途:氨基酸、黄曲霉毒素、维生素、多芳基化合物
折射率(RI)--折射率检测器被认为是一种通用检测器。 折射率检测器是为凝胶渗透色谱法(GPC)创建的第一种检测器。 它依赖于所有样品都会改变溶剂的折射率这一事实,因此它可以检测任何化合物。 折射率检测器通过与未受污染的流动相的参照物进行比较,监测和测量通过的流动相的批量折射特性。 当其他化合物被流动相带走时,与参照物相比,其折射率的变化被记录下来。 使用折射率检测器的缺点是,你只能运行等度法。因为它是一种通用的散装属性检测器,其灵敏度是有限的。 由于这些检测器的能力和功能有限,它们的价格往往与紫外/可见光检测器差不多。常见用途:糖类、聚合物、脂肪酸
蒸发光散射(ELS)--使用ELS检测器的科学家通常会采用该检测器来检测UV/Vis反应较低或没有反应的样品,并且在质谱分析中不能很好地电离。 ELS检测有一些局限性,因为它是一种破坏性的技术,当样品的挥发性与流动相相似时,ELSD的线性范围不大,效果不好。 然而,ELS检测器确实具有广泛的适用性,因为该检测器也是一个批量属性或 "通用 "检测器。 由于ELS检测器为色谱师提供了独特的功能,这些检测器的价格有时可以与PDA相媲美。 常见用途:甘油三酯、脂类、天然产品、糖类和油类。
质量检测--质量检测通过质量分配提供确认,因此,与紫外/可见光和荧光光谱相比,质谱包含更多的定性信息,是目标分子结构所特有的。 质谱既提供了对峰值身份的确认,也提供了敏感的检测。 质量检测器的最大挑战是对中性样品的检测。 当样品不能带上电荷(正或负)时,质量检测器就不能正确地使样品通过检测器来分析它。
即便如此,由于技术上的进步,质谱检测正变得越来越流行,这使得台式检测器的占地面积更小,而且具有用户友好的启动和维护功能,这使得通常是质谱检测的新用户的色谱师更容易接受它。随着越来越多的科学家探索质谱检测的能力,新的化合物电离方式和方法正在被发现和利用。 质谱曾经是一种主要用于定性信息的检测方案,现在正被用于定量目的,特别是用于需要极高灵敏度的检测。 当处理一个实验室获得质量分析的价格时,价格可能会有很大的不同,这取决于所选择的仪器的类型。
即使有了我们今天所涉及的探测器,仍有各种利基探测器需要考虑,其中包括但不限于:电化学、电导率、多角度光散射(MALS)、电晕气溶胶放电(CAD)和光学旋转探测器--仅举几例。
额外的资源。
- LC检测器是如何工作的?请阅读本节中的概述 our primer on HPLC instrumentation.
- 查看范围 HPLC and UPLC detectors 可从沃特公司获得。
请关注我的博客,接下来我将介绍二元和四元液相色谱仪的区别,以及如何选择适合你的实验室需求的仪器。
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