Solutions pour l’analyse de protéines intactes et de protéines sous-unitaires

Solutions pour l’analyse de protéines intactes et de protéines sous-unitaires

Grâce aux technologies de Waters, disposez de solutions rapides et exactes d’analyse des protéines en masse intacte et en sous-unités pour déterminer la confirmation structurelle, les modifications et l’hétérogénéité des glycoformes.  Augmentez la productivité de votre laboratoire grâce à des informations utiles sur la structure des protéine obtenues à l’aide de solutions matérielles et logicielles conformes à la réglementation, combinées à des colonnes robustes, spécifiquement soumises à des tests de contrôle qualité par lots avec des protéines pertinentes.

Grâce aux technologies de Waters, disposez de solutions rapides et exactes d’analyse des protéines en masse intacte et en sous-unités pour déterminer la confirmation structurelle, les modifications et l’hétérogénéité des glycoformes.  Augmentez la productivité de votre laboratoire grâce à des informations utiles sur la structure des protéine obtenues à l’aide de solutions matérielles et logicielles conformes à la réglementation, combinées à des colonnes robustes, spécifiquement soumises à des tests de contrôle qualité par lots avec des protéines pertinentes.


Analyse de protéines intactes
Intact Protein Analysis

Présentation

Les solutions de workflow de Waters permettent de mesurer rapidement et avec exactitude les protéines intactes, afin de confirmer leur identité, leurs modifications et l’hétérogénéité des glycoformes. Il s’agit notamment des solutions suivantes :

  • Solutions MaxPeak Premier pour optimiser les performances et la cohérence des séparations grâce à des systèmes chromatographiques et des consommables spécialement conçus pour des applications spécifiques
  • Spectromètre de masse Xevo G3 Q-Tof et système BioAccord pour une caractérisation et un suivi robustes et puissants, afin de générer des données en masse intacte fiables et d’augmenter la productivité de votre laboratoire
  • Spectromètres de masse SYNAPT XS et SELECT SERIES Cyclic IMS pour caractériser en profondeur les protéines et différencier les conformations grâce à la séparation flexible par fragmentation et par mobilité ionique
  • Système informatique waters_connect pour une plateforme logicielle d’applications conforme à la réglementation, qui permet de partager des méthodes et de gérer les données en toute simplicité

Applications

La spectrométrie de masse et les techniques de diffusion de la lumière peuvent fournir de multiples attributs de qualité des protéines tout au long du procédé de développement et de fabrication. Elles peuvent être appliquées au niveau des protéines intactes ou au niveau des sous-unités, et peuvent impliquer la détermination de l’identité, la caractérisation de modifications post-traductionnelles (telles que l’oxydation, la glycosylation et la PEGylation), l’analyse des impuretés et la caractérisation des oligomères.

La spectrométrie de masse et les techniques de diffusion de la lumière peuvent fournir de multiples attributs de qualité des protéines tout au long du procédé de développement et de fabrication. Elles peuvent être appliquées au niveau des protéines intactes ou au niveau des sous-unités, et peuvent impliquer la détermination de l’identité, la caractérisation de modifications post-traductionnelles (telles que l’oxydation, la glycosylation et la PEGylation), l’analyse des impuretés et la caractérisation des oligomères.


Notes d’application

Notes d’application

Les protéines thérapeutiques sont sujettes à des problèmes de stabilité et d’agrégation, car des changements dans la séquence d’acides aminés ou des modifications chimiques peuvent entraîner un mauvais repliement. La HT-DLS permet d’assurer un criblage rapide et de réaliser des études de stabilité. La SEC-MALS et la SEC-MS, quant à elles, assurent une caractérisation détaillée lors du développement de la formulation.

Les protéines thérapeutiques sont sujettes à des problèmes de stabilité et d’agrégation, car des changements dans la séquence d’acides aminés ou des modifications chimiques peuvent entraîner un mauvais repliement. La HT-DLS permet d’assurer un criblage rapide et de réaliser des études de stabilité. La SEC-MALS et la SEC-MS, quant à elles, assurent une caractérisation détaillée lors du développement de la formulation.


Notes d’application

Notes d’application

Le système MALS en temps réel ultraDAWN permet de contrôler directement les attributs des produits après la purification, améliorant le rendement et la flexibilité. Il combine les méthodes de purification et d’enrichissement en aval, telles que IEX, FPLC ou TFF, pour mesurer la masse moléculaire, la concentration, la taille et les impuretés en temps réel, simplifiant le traitement des données et optimisant le rendement. 

Le système MALS en temps réel ultraDAWN permet de contrôler directement les attributs des produits après la purification, améliorant le rendement et la flexibilité. Il combine les méthodes de purification et d’enrichissement en aval, telles que IEX, FPLC ou TFF, pour mesurer la masse moléculaire, la concentration, la taille et les impuretés en temps réel, simplifiant le traitement des données et optimisant le rendement. 


Notes d’application

Notes d’application

L’efficacité des produits thérapeutiques à base de protéines dépend fortement de la spécificité de la liaison et de la stabilité de la molécule. Les techniques de diffusion de la lumière et la calorimétrie fournissent des méthodes orthogonales qui peuvent cibler les candidats, optimisés à la fois au niveau de la cinétique de liaison et de la stabilité.

L’efficacité des produits thérapeutiques à base de protéines dépend fortement de la spécificité de la liaison et de la stabilité de la molécule. Les techniques de diffusion de la lumière et la calorimétrie fournissent des méthodes orthogonales qui peuvent cibler les candidats, optimisés à la fois au niveau de la cinétique de liaison et de la stabilité.




Webinaire : Sélection et entretien des colonnes SEC pour les peptides et les protéines biothérapeutiques

La chromatographie d’exclusion stérique (SEC) est couramment utilisée dans les procédures de recherche, de développement et de commercialisation de peptides et de protéines biothérapeutiques. Le succès des méthodes SEC passe par la sélection d’une colonne SEC appropriée, en fonction des besoins de l’application et des instruments LC utilisés, ainsi que d’une méthode de séparation permettant de générer des données quantitatives fiables. Regardez notre webinaire et apprenez comment sélectionner la colonne SEC adaptée à votre application et à vos exigences de séparation.

La chromatographie d’exclusion stérique (SEC) est couramment utilisée dans les procédures de recherche, de développement et de commercialisation de peptides et de protéines biothérapeutiques. Le succès des méthodes SEC passe par la sélection d’une colonne SEC appropriée, en fonction des besoins de l’application et des instruments LC utilisés, ainsi que d’une méthode de séparation permettant de générer des données quantitatives fiables. Regardez notre webinaire et apprenez comment sélectionner la colonne SEC adaptée à votre application et à vos exigences de séparation.


Deux scientifiques révisant des données dans un laboratoire

Solutions


Améliorez l’efficacité et accélérez la cadence d’analyse des échantillons grâce à des solutions adaptées aux laboratoires effectuant la séparation et l’analyse de protéine intactes.

Améliorez l’efficacité et accélérez la cadence d’analyse des échantillons grâce à des solutions adaptées aux laboratoires effectuant la séparation et l’analyse de protéine intactes.

Analyses biopharmaceutiques de routine accessibles et plus rapides

Analyses biopharmaceutiques de routine accessibles et plus rapides

Prenez rapidement et en toute confiance des décisions sur la base de données accessibles et de haute qualité, grâce au système LC/MS BioAccord avec ACQUITY Premier spécialement conçu pour le suivi en routine dans le cadre des procédés biopharmaceutiques et du développement de produits.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Couverture complète pour une caractérisation fiable

Couverture complète pour une caractérisation fiable

Avec le spectromètre de masse Xevo G3 Q-Tof, maximisez les informations sur les échantillons pour vos analytes et ayez une confiance totale dans vos résultats d’analyse, depuis la caractérisation détaillée jusqu’à la quantification juste, des petites molécules difficiles aux produits biothérapeutiques complexes.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Une flexibilité optimale pour des découvertes plus approfondies

Une flexibilité optimale pour des découvertes plus approfondies

Contrairement aux systèmes concurrents dotés d’options d’entrée restreintes ou de limitations de la fonction de balayage, ou nécessitant plusieurs plateformes, seul Waters propose une solution LC/MS hautement performante et polyvalente : le spectromètre de masse SYNAPT XS. Ce dernier permet une flexibilité optimale et une plus grande liberté de choix analytiques, au service de la créativité scientifique et du succès technique pour n’importe quelle application.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Infinité de possibilités, pour une recherche illimitée

Infinité de possibilités, pour une recherche illimitée

Élaboré grâce à une collaboration ciblée, le système SELECT SERIES Cyclic IMS associe la technologie innovante de séparation par mobilité ionique cyclique aux performances de pointe de la spectrométrie de masse à temps de vol, offrant ainsi aux chercheurs le moyen d’élargir le champ de leurs recherches scientifiques.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Plateforme universelle en chromatographie liquide

Plateforme universelle en chromatographie liquide

Éliminez le caractère imprévisible des pertes d’analytes dues aux interactions métalliques grâce aux solutions MaxPeak Premier, qui associent des technologies de pointe pour les colonnes et les systèmes, assurant une sensibilité et une reproductibilité maximales.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Détecteur d’une flexibilité unique pour chaque étape du développement

Détecteur d’une flexibilité unique pour chaque étape du développement

Exploitez le détecteur DAWN MALS après une LC pour analyser le rapport protéines/complexes, les modifications post-traductionnelles et l’agrégation, et vous aider à chaque étape du développement. Utilisez-le avec le système Eclipse pour mesurer l’affinité de liaison lors de la recherche.

  • Candidate Screening
  • Chromatography
  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Mesure de la taille et du potentiel zêta dans un tampon natif

Mesure de la taille et du potentiel zêta dans un tampon natif

Réalisez des examens DLS, SLS et ELS sur une même plateforme avec l’instrument DynaPro ZetaStart : spécialement conçu pour le domaine biopharmaceutique, il permet de mesurer le potentiel zêta dans des tampons de formulation sans dilution.

  • Aggregation and Stability
  • Chromatography

Criblage à haute cadence de la taille et de la stabilité

Criblage à haute cadence de la taille et de la stabilité

Mesurez la taille, la polydispersité et les données Tagg de centaines d’échantillons avec seulement 4 µL par puits, grâce au lecteur de plaques DynaPro DLS. Celui-ci utilise des plaques à puits standard et s’intègre à n’importe quel système de manipulation des liquides pour accroître encore la productivité.

  • Candidate Screening
  • Aggregation and Stability

Une avancée majeure dans la technologie PAT (Process Analytical Technology) pour les nanoparticules, les produits biopharmaceutiques et les polymères

Une avancée majeure dans la technologie PAT (Process Analytical Technology) pour les nanoparticules, les produits biopharmaceutiques et les polymères

Suivez directement le titre, la taille et les impuretés en temps réel grâce au détecteur à diffusion de lumière multi-angles (MALS) ultraDAWN, qui combine parfaitement les méthodes de purification et d’enrichissement en aval, telles que IEX, FPLC ou TFF.

  • Real-Time Process Monitoring

Logiciel d’applications utilisable en réseau et conforme aux exigences réglementaires pour simplifier l’acquisition des données LC/MS, leur traitement et la création des rapports.

Logiciel d’applications utilisable en réseau et conforme aux exigences réglementaires pour simplifier l’acquisition des données LC/MS, leur traitement et la création des rapports.

Analyse et traitement des données simplifiés

Analyse et traitement des données simplifiés

Accélérez le processus de l’analyse de l’échantillon à la prise de décision avec waters_connect pour produits biopharmaceutiques, qui comprend des applications et workflows dédiés à l’analyse en masse intacte, à la confirmation de séquence, au suivi multi-attributs (MAM) et bien plus encore.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability

Réalisez des séparations très efficaces pour l’analyse et la purification des protéines, y compris par chromatographie d’exclusion stérique pour l’agrégation, par chromatographie en phase inverse pour les protéines intactes et sous-unitaires, par échange d’ions pour les variants de charge et par chromatographie hydrophile pour l’analyse des glycoprotéines.

Réalisez des séparations très efficaces pour l’analyse et la purification des protéines, y compris par chromatographie d’exclusion stérique pour l’agrégation, par chromatographie en phase inverse pour les protéines intactes et sous-unitaires, par échange d’ions pour les variants de charge et par chromatographie hydrophile pour l’analyse des glycoprotéines.

Des séparations plus fiables pour les composés biologiques

Des séparations plus fiables pour les composés biologiques

Réduisez les interactions ioniques ou hydrophobes secondaires en chromatographie d’exclusion stérique avec les colonnes ACQUITY et XBridge Premier Protein SEC 250 Å dotées de la technologie MaxPeak HPS (High Performance Surface) pour des analyses fiables d’agrégats, de monomères et de fragments de protéines à l’aide d’une méthode générique offrant une augmentation de 30 % de la résolution.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Solutions innovantes pour la caractérisation des anticorps monoclonaux pour les analyses de variants de charge, d’unités intactes et de sous-unités

Solutions innovantes pour la caractérisation des anticorps monoclonaux pour les analyses de variants de charge, d’unités intactes et de sous-unités

Les colonnes BioResolve RP mAb Polyphenyl offrent une capacité de pic améliorée et un risque de contamination croisée minimal pour l’analyse d’unités intactes et de sous-unités de protéines et de mAb spécifiquement testées en contrôle qualité avec un étalon de sous-unité de mAb NIST. Les colonnes et tampons BioResolve SCX mAb séparent de manière fiable les variants de charge pour une large gamme de mAb en utilisant des phases mobiles compatibles avec la LC/MS ou la détection optique.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Sélectivité unique pour une analyse optimale des profils de glycosylation

Sélectivité unique pour une analyse optimale des profils de glycosylation

Analysez le taux des glycanes et les profils des glycoprotéines à partir de protéines intactes grâce à une phase stationnaire HILIC à larges pores et une sélectivité unique de la colonne ACQUITY Premier Glycoprotein BEH Amide 300 Å. 

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Des résultats reproductibles et rapides pour les applications de bioprocédés ainsi que de découverte et de développement de médicaments

Des résultats reproductibles et rapides pour les applications de bioprocédés ainsi que de découverte et de développement de médicaments

Accélérez le développement de médicaments avec des colonnes courtes à haute cadence d’analyse et obtenez des chromatographies d’exclusion stérique en moins de 2 minutes, des glycoformes en 3 minutes, ainsi que des variants de charge et des analyses de sous-unités en moins de 4 minutes. En plus d’accélérer les analyses, les colonnes à haute cadence permettent de réduire jusqu’à 80 % la consommation de solvant (pour la colonne BioResolve Premier RP mAb Polyphenyl). 

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Comparaison et validation de l’analyse LC d’unités intactes et de sous-unités

Comparaison et validation de l’analyse LC d’unités intactes et de sous-unités

Gagnez en efficacité et en qualité grâce à la gamme d’étalons de Waters fabriqués, soumis à des tests de contrôle qualité et certifiés ISO pour les colonnes recommandées, afin de confirmer les performances instrumentales, interlots et intercolonnes avant de tester des échantillons de valeur.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Real-Time Process Monitoring
  • Candidate Screening

Gagnez en efficacité et en temps grâce à des solutions d’automatisation de laboratoire vérifiées.

Gagnez en efficacité et en temps grâce à des solutions d’automatisation de laboratoire vérifiées.

Amélioration de l’efficacité et du rendement de la préparation des échantillons

Amélioration de l’efficacité et du rendement de la préparation des échantillons

Préparez facilement vos échantillons pour les analyses LC-MS quantitatives grâce à des workflows vérifiés qui permettent de réduire au minimum la variabilité, d’améliorer la traçabilité et de simplifier le transfert des méthodes.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Candidate Screening
  • Real-Time Process Monitoring

La réussite à portée de clic

La réussite à portée de clic

Optimisez la productivité et le succès de votre laboratoire avec Waters Global Services, pour maintenir une performance optimale des systèmes, minimiser les temps d’immobilisation, prendre en charge les applications les plus complexes et répondre aux strictes exigences de conformité.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Candidate Screening
  • Real-Time Process Monitoring

Rendez la science plus accessible grâce à Waters Capital

Rendez la science plus accessible grâce à Waters Capital

Maximisez les ressources et minimisez les risques grâce aux options de paiement proposées par Waters Capital, notamment la mise à niveau des équipements vieillissants, une assistance personnalisée et le regroupement de l’ensemble de vos services en un seul forfait mensuel.

  • Identity and Post-Translational Modification Analysis
  • Aggregation and Stability
  • Candidate Screening
  • Real-Time Process Monitoring

Les données parlent d’elles-mêmes

Les données parlent d’elles-mêmes
Analyse du matériau de référence NISTmAb 8671 sur une colonne XBridge Premier Protein SEC 250 Å et sur une colonne de silice dSEC-2 concurrente. Séparation isocratique réalisée avec une phase mobile de PBS dilué au 1/2 dans l’eau, un débit de 0,57 mL/min et une détection UV à 280 nm.
À l’aide du kit d’analyse en masse intacte UPLC, des cycles à gradient rapide ont été appliqués pour régénérer la colonne aux conditions de pré-injection dans le cadre de l’analyse d’un anticorps intact. Le chromatogramme en courant ionique total (TIC) ne montre aucune contamination croisée détectable à la suite d’une injection de 0,5 µg. Il n’est dès lors plus nécessaire de recourir à des injections de blanc inter-analyses avec des échantillons difficiles. 
Analyse de la carte peptidique des fractions du trastuzumab. (A) Fractions de trastuzumab collectées à partir d’une colonne BioResolve SCX mAb, 4,6 × 100 mm. (B) Image miroir des cartes peptidiques des fractions 5 et 7. Un pic à un temps de rétention de 30,24 min était significativement augmenté dans la fraction 5 par rapport à celui de la fraction 7 (indiqué par la flèche bleue). (C) Chromatogrammes d’ion extrait (XIC) pour les peptides identifiés. Le pic à 30,26 min a été identifié comme étant une désamidation du peptide ASQDVNTAVAWYQQKPGK. Le pic non modifié a un temps de rétention de 29,63 min. (D) Comparaison de fragments MS/MS du peptide désamidé et non modifié ASQDVNTAVAWYQQKPGK. Les fragments ne contenant pas d’asparagine ont la même valeur de masse, tandis que les fragments en contenant diffèrent de 1 Da dans la masse.
Spectres MS combinés, zoom et masses déconvoluées MaxEnt1 correspondantes du trastuzumab obtenus en utilisant différents comptages IDC.
Séparation de l’étalon de sous-unité de mAb à l’aide d’un gradient de 1 minute et d’un gradient de 4 minutes sur une colonne de 20 mm, ainsi qu’un gradient de 20 minutes sur une colonne de 100 mm. Des spectres combinés comparables des trois pics principaux et de la masse déconvoluée (insertion) ont été obtenus.
Comparaison de la séparation LC/MS de l’étalon de sous-unité mAb sur une colonne BioResolve Premier RP mAb Polyphenyl 450 Å 2,7 µm de 2,1 x 20 mm (gradient de 4 minutes) et sur une colonne BioResolve RP mAb Polyphenyl 450 Å 2,7 µm de 2,1 x 100 mm (gradient de 20 minutes).

Webinaires et ressources



  • Guide d’applications

Focus sur les produits thérapeutiques à base de protéines

Focus sur les produits thérapeutiques à base de protéines
  • eBook

Amélioration des séparations chromatographiques de produits biopharmaceutiques grâce à la technologie MaxPeak HPS

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Documents associés

Grâce aux solutions Waters pour l’analyse des produits biothérapeutiques, assurez la sécurité des patients en réalisant des essais sur les protéines de cellules hôtes (HCP) afin de répondre aux exigences réglementaires et de minimiser le risque de réponses immunogènes.

Garantissez le respect des normes de qualité et de développement des médicaments grâce aux solutions de pointe de Waters pour la purification, la caractérisation et le suivi en laboratoire de peptides synthétiques tels que le GLP-1 (glucagon-like peptide 1).

Découvrez-en davantage sur les solutions d’analyse des protéines intactes et sous-unitaires.

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