分离模式

反相色谱

反相色谱是实验室目前常用的液相色谱分离技术，沃特世目前对这类色谱柱产品提供了丰富的选择，这项技术的受欢迎程度由此可见一斑。

简单说来，反相色谱方法采用极性流动相，通常是水或缓冲液与极性溶剂（例如甲醇、乙腈或四氢呋喃）的混合物，以及非极性固定相（例如与硅胶或杂化载体键合的长链烃）。近年来，业界在分离介质领域开展了大量研发工作，旨在改善柱效、pH稳定性并提供替代选择性。

沃特世的现代色谱柱填料大体可分为三类：

• 杂化填料 – 专为实现优异的pH稳定性而设计，旨在提供更灵活的方法开发选择。提供XBridge、ACQUITY BEH和XTerra品牌；pH范围1–12。
• 硅胶填料 – 过去常用的反相载体是SunFire和Symmetry产品，由沃特世陶顿生产基地的原料合成，旨在尽可能提高载样量；pH范围2–7。
• 特定应用专用填料 – 专门针对特定应用领域而设计，例如用于增强极性分子保留性的Atlantis色谱柱。

正相色谱

在开发出反相键合相之前，正相色谱是常用的分离技术。该技术依赖于分析物与固定相表面极性官能团之间的相互作用，当使用非极性溶剂作为流动相时，这种相互作用最强。

正相色谱是一种非常强大的分离工具，因为可使用各种溶剂精确调整分离选择性。然而，由于该技术存在一定程度的复杂性，因此受到许多色谱工作者的冷遇。有时，可能会遇到平衡时间长或重现性问题，这主要是因为该技术对流动相中存在的低浓度极性污染物非常敏感。如果这些问题得到控制，由于常用溶剂的粘度较低，该技术提供的色谱图通常优于反相方法。

正相色谱柱有SunFire、Nova-Pak和Spherisorb产品系列可供选择。

HILIC（亲水作用色谱）

亲水作用色谱已经应用了很长时间，但“HILIC”一词直到最近才开始普遍使用。该技术适用的分析物为强极性化合物，例如极性代谢物、碳水化合物或肽。

HILIC可以视为正相色谱向水性流动相领域的延伸。流动相为水或缓冲液(< 40%)与有机溶剂的混合物。固定相为强亲水性极性吸附剂，例如硅胶、极性键合相、极性聚合物填料和离子交换剂。所有这些固定相的共同点在于它们都容易吸附水，因此被归类为“亲水性”固定相。

HILIC模式中采用的梯度方法与反相模式中的梯度方法完全相反。HILIC模式的初始条件为含高含量有机相（通常为95%），然后逐渐向更高含量的水相移动。为此，该模式也常用“反反相”一词指称。

该技术越来越受欢迎，因此成为越来越多色谱柱填料研究的主题。

Waters HILIC色谱柱目前有Atlantis、CORTECS、XBridge和ACQUITY产品系列可供选择。