质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶

质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶

实现快速、杂质少且完全的蛋白质酶解

实现快速、杂质少且完全的蛋白质酶解

生物制药肽图分析或自下而上蛋白质组学中的蛋白质酶解存在两项不足:酶解时间长,性能权衡复杂。在保持高重现性、低干扰和完整序列覆盖率的同时平衡速度和酶解完整性也是一个持续的挑战。此外,各种非胰蛋白酶峰(漏切、自溶峰、非特异性裂解和不匹配峰)的图较为杂乱,通常会减缓数据分析过程中的工作效率。这些意外的小峰数量众多,鉴定起来非常耗时,由此拖慢了关键工作的速度。

质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶具有异常高的抗自溶性、高纯度且活性更强,可实现优异的速度和低酶解干扰。RapiZyme胰蛋白酶几乎消除了困扰市场上热门胰蛋白酶的自溶现象,可以在相对较高的浓度下使用,实现更快速的酶解,而无需采用高温或牺牲酶解完整性。因此,能缩短样品周转时间、提高实验室运营效率,并且最重要的是,助力可靠并快速地制定决策。

RapiZyme Trypsin used to improve protein digestions for biopharmaceutical peptide mapping or bottom-up proteomics. 质谱(MS)级RapiZyme胰蛋白酶

规格

概述

  • 通过使用更高的抗自溶性酶:蛋白质(E:P)比率,无需高温即可实现30分钟高效酶解
  • 通过更稳定的基线进行更高效的数据分析
  • 获得高序列覆盖率,实现可靠的表征和鉴定
  • 作为一种经过化学优化的重组表达的猪序列胰蛋白酶,获得出色的重现性和可预测性
  • 通过使用与LC-MS兼容的辅料冻干,提高复溶后的稳定性、样品瓶回收率和活性,获得一致的性能
  • 稳定而灵活,适用于各种工作流程优化方案

推荐用途:在生物制药肽图分析或自下而上蛋白质组学中改善蛋白质酶解。


RapiZyme工作原理

RapiZyme胰蛋白酶是一种经过化学优化的重组胰蛋白酶。因为它并非来自动物,因此不含污染性胰凝乳蛋白酶,无需使用L-(甲苯磺酰氨基-2-苯基)乙基氯甲基酮(TPCK)抑制剂进行处理,因此不存在非特异性酶解相关的问题。


快速酶解

广泛而均一的甲基化赋予RapiZyme胰蛋白酶异常高的抗自溶性。这使得RapiZyme胰蛋白酶能够以高E:P比(例如,1:5)使用,只需30分钟即可完成充分酶解,而无需借助更高温度。使用Remicade®作为案例研究,RapiZyme胰蛋白酶提供<0.1%的自溶峰和<1%的漏切(以总TIC响应的百分比来衡量)。业内出色的胰蛋白酶竞品在相同条件下提供6%–7%的自溶峰和4%–5%的漏切。


稳定的基线

通过识别图中的细微变化来制定关键决策。监管机构要求对每个峰进行鉴定。不匹配的峰、伪影峰、自溶峰和漏切峰都是耗时且不必要的噪音。需要对它们进行额外的科学审查和分析,当包括非胰蛋白酶峰或来自胰蛋白酶酶解本身的计算机模型的自溶峰时,软件处理时间激增。

借助RapiZyme胰蛋白酶,您可以快速、可靠地使用不含噪音和伪影峰的优异基线。所有这些均可通过30分钟酶解实现。


重现性和纯度 – 您的胰蛋白酶有哪些成分?

RapiZyme胰蛋白酶为均匀甲基化的重组(非动物源性)胰蛋白酶,不含污染性胰凝乳蛋白酶。此外,还使用与LC-MS兼容的辅料将其冻干,使复溶变得容易且可预测,并提高从瓶中转移的回收率。

结果在批次间和酶解间均具有出色的重现性。


使用灵活

RapiZyme胰蛋白酶可以实现任何胰蛋白酶(在溶液中或固定化)的用途,并且性能远远优于常规胰蛋白酶。借助RapiZyme胰蛋白酶,可以做到:

  • 无需脱盐并提高MAM、PTM监测、生物加工和蛋白质组学应用的一致性。RapiZyme胰蛋白酶借助适量的盐酸胍保持高活性
    • 将盐酸胍稀释至0.5–0.7M,并以1:5的酶:蛋白质比(pH 7.5)在2小时内完成酶解
  • 对于任何应用(首选过夜酶解)都能控制伪影,而不影响酶解效率
    • 可在室温和pH 6.5条件下以1:100的酶:蛋白质比酶解过夜
  • 将传统的1:20酶:蛋白质比的酶解时间缩短至1–3小时,提供更高的灵活性
  • 使用热稳定的RapiZyme加热,消除对固定化酶的需求,从而更简单轻松地酶解蛋白质
    • 在70 °C下以1:10的酶:蛋白质比酶解1小时

资源

文档

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支持

支持


相关信息

利用创新的MS兼容型RapiGest SF表面活性剂增强凝胶内和溶液内蛋白质的酶解。

使用IonHance改性剂和缓冲液改善分析物保留性和峰形,适用于LC和LC-MS应用(例如蛋白质、肽和小分子的反相分离,以及电荷异构体分析)。

使用ACQUITY Premier色谱柱提高灵敏度和分析物回收率,同时缩短色谱柱钝化时间并减少不必要的分析物/表面相互作用。

了解XSelect Premier UHPLC色谱柱,这款色谱柱旨在改善峰形、大幅提高选择性,同时减少不必要的分析物/表面相互作用。

优惠与折扣

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RapiZyme Trypsin,质谱(MS)级,重新定义了蛋白质消化,以无与伦比的速度、清洁度和效率平衡,使其成为生物制药肽图谱和自下而上蛋白质组学的必备工具。旨在克服长时间消化、复杂权衡和不可预测结果的常见挑战,RapiZyme Trypsin 提供了一种可靠的解决方案,加速工作流程,提高可重复性,并消除耗时的伪影。

蛋白质消化传统上难以在不牺牲速度或清洁度的情况下保持高序列覆盖率、低伪影和可重复性。RapiZyme Trypsin 通过其广泛和均匀的甲基化提供快速、清洁和完整的消化,赋予极高的自溶抗性。这一创新特性允许使用高酶与蛋白质(E:P)比率,在不提高温度或影响消化质量的情况下,在短短 30 分钟内实现完全消化。例如,在 1:5 E:P 比率下,RapiZyme Trypsin 实现了小于 0.1% 的自溶峰和小于 1% 的未切割,显著优于行业领先的竞争对手酶在相同条件下产生的 6–7% 自溶峰和 4–5% 未切割。

在监管环境中,干净的基线对于自信决策至关重要,每个峰值都必须精确识别。RapiZyme Trypsin 消除了未匹配峰、自溶伪影和非特异性切割的噪音,确保您的数据图无不必要的干扰。通过显著减少处理时间和科学审查工作,RapiZyme Trypsin 提高了生产力并加快了分析速度,让您专注于最重要的见解。

可重复性是 RapiZyme Trypsin 的另一个标志,通过其化学优化的重组(非动物来源)配方实现。与传统胰蛋白酶不同,RapiZyme 不含污染的胰凝乳蛋白酶,也不需要使用 TPCK 抑制剂进行处理,这通常会引入非特异性消化挑战。该酶与 LC-MS 兼容的赋形剂一起冻干,增强了稳定性、活性和小瓶回收率,同时确保跨批次和消化的可预测和一致的性能。这种可靠性使 RapiZyme Trypsin 成为高风险应用的理想选择,在这些应用中,精度和可重复性是不可妥协的。

RapiZyme Trypsin 还具有显著的多功能性,能够轻松适应各种工作流程。对于快速消化需求,它可以在 1:5 E:P 比率下在 30 分钟内实现完全消化,而无需高温。对于更传统的工作流程,它加快了消化时间,允许在 1–3 小时内在 1:20 E:P 比率下完成蛋白质消化。即使在室温下以 1:100 E:P 比率进行的过夜消化,也能提供一致的结果,同时避免伪影。此外,RapiZyme Trypsin 即使在少量盐酸胍中也表现出高活性,支持无脱盐工作流程,并增强多属性方法(MAM)、翻译后修饰(PTM)监测、生物加工和蛋白质组学等应用的一致性。

当热稳定性有利时,RapiZyme Trypsin 支持在高温下进行消化,例如在 70°C 下以 1:10 E:P 比率进行 1 小时消化,消除了对固定化酶的需求。这种灵活性扩展了其在广泛协议中的适用性,使其成为专注于提高操作效率和数据质量的实验室的多功能和强大工具。

RapiZyme Trypsin,MS 级,通过结合速度、清洁度和灵活性而不影响可重复性或质量,为蛋白质消化设定了新标准。无论您是在进行监管提交的肽图谱还是推动高通量蛋白质组学工作流程,RapiZyme Trypsin 都能提供卓越的性能,使您能够自信和精确地做出关键决策。

常见问题

1. 推荐的酶与蛋白质(E:P)比率是多少?
RapiZyme Trypsin 的最佳酶与蛋白质(E:P)比率取决于您的工作流程要求,但其高自溶抗性允许显著的灵活性。对于快速消化,推荐 1:5 比率,在不提高温度的情况下在 30 分钟内实现完全消化。对于标准工作流程,1:20 比率可以在 1–3 小时内实现完全消化,提供速度和效率之间的平衡。如果您更喜欢过夜消化,室温(pH 6.5)下的 1:100 比率确保一致且无伪影的结果。

2. RapiZyme Trypsin 最适合用于哪些应用?
RapiZyme Trypsin 非常适合用于生物制药肽图谱和自下而上蛋白质组学。其无与伦比的自溶抗性和高纯度使其非常适合需要快速、清洁和可重复蛋白质消化的工作流程。多属性方法(MAM)、翻译后修饰(PTM)监测和监管肽分析等应用极大地受益于其能够提供更清洁的基线和更少的非胰蛋白酶峰。此外,RapiZyme Trypsin 的稳定性和适应性使其成为生物加工和蛋白质组学应用的宝贵工具,这些应用需要精度、高序列覆盖率和无伪影的结果。