합성 중에 생성된 불순물로부터 전체 길이 올리고뉴클레오타이드 생성물을 정제하는 일은 제약 및 진단 응용 분야에서 기능성, 안전성 및 효율성을 보장하기 위해 필수적입니다. 올리고뉴클레오타이드는 다중음이온 특성으로 인해 정제 시 높은 선택도와 분리능을 얻기란 쉽지 않습니다. 이온쌍 역상 크로마토그래피(IP-RP)가 선호되는 지배적 기술로 부상했습니다.
높은 pH와 온도 안정성을 가진 컬럼의 배치 테스트와 2차 상호작용의 수준을 제어함으로써 시간 소모적인 병목현상을 빠르게 제거할 수 있습니다. Waters XBridge Oligonucleotide BEH C18 OBD(Optimal Bed Density) 컬럼은 최상의 분취용 컬럼으로, 복잡한 화학적 변형을 가진 다양한 올리고의 젱제에서 확실한 성능, 일관된 확장성 및 높은 회수율을 제공합니다.
종횡비가 더 작은 분취용 컬럼의 경우, 작은 입자로 구성된 고압 슬러리 패킹은 잘 설계된 분석용 컬럼에서와 같은 바람직한 층 밀도를 얻지 못하는 경우가 많습니다. 주입구에서 축 방향 압축이 과도하면 입자 파손, 채널링 및 베드 투과성 감소로 이어질 수 있습니다. 세심하게 설계된 OBD 컬럼은 컬럼 수명 연장, 효율성 향상, 피크 모양 개선, 낮은 역압 등 상당한 이점을 제공합니다.
올리고뉴클레오타이드를 포함한 핵산은 다중음이온(음전하)을 띠고 있어 스테인리스 스틸 컬럼에서 금속산화물 표면에 쉽게 흡착됩니다. Waters XBridge Premier Oligonucleotide BEH C18 OBD 컬럼은 핵산의 비특이적 흡착(NSA)을 크게 감소시키는 불활성 하이브리드 유기/무기 실리카 기반 표면 케미스트리를 갖도록 변형된 하드웨어 구성품으로 제작되어 추가 연구를 위해 약물 물질에서 분리해야 하는 특정 화합물의 회수율을 높이고 재현성을 개선합니다. 또한 XBridge Premier Oligonucleotide BEH C18 OBD 컬럼은 컬럼 부동태화/샘플 컨디셔닝이 필요하지 않으므로 분획 분취 실행을 지체 없이 시작할 수 있습니다.
올리고뉴클레오타이드용 Waters 배치 인증 BEH(Bridged/Ethyl Hybrid) 기술은 정제를 위한 추가적인 성능, 재현성 및 확장성을 보장합니다. 높은 온도 및 높은 pH는 올리고뉴클레오타이드 분리 및 정제에서 2차 상호 작용을 줄이기 위한 일반적인 전략입니다. BEH 입자 기술은 일반적으로 올리고뉴클레오타이드 분석에 필요한 높은 pH, 온도 및 첨가물과 같은 가혹한 조건에 잘 견딥니다.
배치 테스트 및 QC 인증을 마친 XBridge Oligonucleotide OBD Prep 컬럼은 재현성과 분석법 전환에 대한 추가적인 보증을 제공하며 표준 및 화학적으로 다양한 새로운 siRNA, ASO 및 올리고뉴클레오타이드 시약의 엄격해지고 있는 정제 요구 사항을 지원합니다. 각 배치의 Oligonucleotide BEH C18 흡착제는 Waters MassPrep 올리고뉴클레오타이드 표준물질과 트리에틸암모늄 아세테이트 IP-RP 분리를 통한 엄격한 분리능 및 피크 테일링 평가에 기반한 QC 테스트를 거쳐 선정되었습니다. 세심한 검사를 거친 이러한 흡착제는 2.5 및 5µm 입자 크기와 130 및 300Å 공극 크기로 제공되어 올리고뉴클레오타이드 화학자에게 다양한 합성 제품을 정제할 수 있는 활용도 높은 옵션을 제공합니다.
XBridge 및 XBridge Premier Oligonucleotide OBD Prep 컬럼은 Waters BEH(Bridge Ethyl Hybrid) C18 하이브리드 실리카 입자로 채워져 있으며 높은 pH 및 온도 조건에서 뛰어난 컬럼 수명을 유지하는 동시에 뛰어난 분리 성능을 발휘합니다. Oligonucleotide BEH C18 컬럼은 세심한 주의를 기울이면 효율성이나 머무름의 손실 없이 10,000회 이상 주입이 가능한 것으로 알려져 있습니다.
분취용 정제에서 로딩 용량은 여러 파라미터의 영향을 받습니다. 컬럼 효율성, 공극 크기, 입자 크기 및 분석법 파라미터가 중요한 역할을 합니다. 공극 크기가 큰 컬럼은 대형 분석물질의 질량 전환을 개선하고 더 선명한 피크를 제공합니다. 이러한 컬럼은 표면적 감소로 로딩 용량이 낮아질 수 있습니다. Waters XBridge Oligonucleotide OBD Prep 컬럼은 다양한 공극 크기와 광범위한 컬럼 내경으로 제공되어 예측 가능한 확장성과 향상된 로딩 용량의 이점을 제공합니다.
독성학 연구에서 원치 않는 불순물과 관련된 안전성 및 효능 문제를 완화시키려면 고순도 및 고품질의 올리고뉴클레오타이드 정제가 매우 중요합니다. 고효율 2.5µm XBridge Oligonucleotide OBD Prep 컬럼은 회수율 저하 없이 크로마토그래피 프로파일을 유지하면서 조기 및 동시 용리 불순물의 분리를 용이하게 합니다.
올리고뉴클레오타이드의 인산디에스테르 그룹은 표준 컬럼 구성에 사용되는 금속을 흡착할 수 있습니다. 저흡착 컬럼 하드웨어 구성품을 사용하면 킬레이션이 최소화되어 머무름 신뢰성과 크로마토그래피 파라미터의 일관성이 높아지므로 피크 모양을 개선할 수 있습니다. XBridge Premier Oligonucleotide BEH C18 OBD 130Å 및 300Å 5µm Prep 컬럼은 MaxPeak HPS 증기 증착 구성품으로 제조되어 피크 모양을 개선하고 회수율을 높입니다. 이 컬럼은 10mm 내경과 50mm, 100mm 및 150mm 길이로 제공됩니다.
배치 테스트를 거쳐 QC 인증을 얻은 XBridge Oligonucleotide OBD Prep 컬럼은 실험실 규모의 정제 옵션을 위해 다양한 직경과 길이로 제공되어 스케일업이 예측 가능하고 직접적입니다. 크기는 다음과 같습니다.
XBridge Oligonucleotide 130 & 300Å 5µm OBD Prep 컬럼, 스테인리스 스틸 및 MaxPeak 하드웨어로 제공되는 표준 및 넓은 공극 옵션을 갖춘 HPLC 분석법 개발을 위한 장비, 올리고 배치 테스트 및 QC 인증을 거쳤습니다.
XBridge Oligonucleotide 130Å 2.5µm OBD Prep 컬럼은 탁월한 샘플 분리능과 우수한 컬럼 수명을 제공합니다.
XBridge Oligonucleotide BEH C18 300Å 2.5µm OBD Prep 컬럼 옵션은 대형 올리고를 정제하기 위한 맞춤형 제품으로 제공됩니다. 사용자 정의 견적을 요청하려면 영업 부서에 문의하십시오
새로운 XBridge Oligonucleotide BEH C18 130Å 2.5µm OBD Prep 컬럼을 사용한 25mg 정제 실행에 대한 분획 순도 측정.
(A) MaxPeak Premier(검정색 트레이스) 및 표준물질(회색 트레이스) ACQUITY UPLC BEH C18, 130Å, 1.7µm, 2.1 x 50mm 컬럼을 사용하여 하이드로코르티손 인산염에 대해 얻은 크로마토그램 비교. 질량 로드는 2ng이었습니다. 아세토니트릴 그레디언트 분리는 10mM 포름산 암모늄(pH 3.0) 수용성 이동상, 0.5mL/분의 유량 및 30°C의 온도에서 수행되었습니다. 피크는 PDA 검출기 사용하여 검출했으며, 246nm 채널이 표시되었습니다. (B) MaxPeak Premier(검정색 기호) 및 표준물질(회색 기호) 컬럼을 사용하여 분리한 하이드로코르티손 인산염의 피크 면적 대 질량 로드의 로그-로그 플롯(질량 로드 2-200ng).
