Las secuencias de transgenes/ácidos nucleicos de cadena larga en las terapias celulares y génicas oscilan entre 1000 y más de 10 000 nucleótidos de longitud. Confirmar su identidad y pureza es de vital importancia para garantizar la seguridad y la eficacia de estas nuevas modalidades. Las columnas y los sistemas cromatográficos de Waters, combinados con la detección óptica o la espectrometría de masas, proporcionan potentes capacidades para confirmar las propiedades fisicoquímicas de estos ácidos nucleicos y de su producto farmacéutico completamente montado cuando se empaquetan en nanopartículas lipídicas (LNP), vectores virales (p. ej., AAV) o partículas similares a virus (VLP) para la administración de células.
Seminario online a demanda: Análisis de LC-MS CQA de productos terapéuticos de ARN
Los sistemas LC y LC-MS de Waters ofrecen un rendimiento de separaciones y una sensibilidad líderes para el análisis de ácidos nucleicos.
Los sistemas y columnas MaxPeak Premier eliminan la imprevisibilidad de las pérdidas de analitos debidas a interacciones con metales, que pueden ser especialmente pronunciadas con los ácidos nucleicos cargados negativamente.
Posibilite análisis biofarmacéuticos de LC-MS de rutina en todos los laboratorios con el sistema de LC-MS BioAccord de Waters, que combina la confianza de los datos de masa exacta y el software waters_connect para el análisis de datos y la generación de informes con cumplimiento normativo.
Acelere la caracterización de ácidos nucleicos con el sistema de sobremesa HRMS de alto rendimiento Xevo G3 QTof y convierta ese conocimiento en ensayos de monitorización eficientes, que proporcionen resultados cualitativos y cuantitativos exactos con el intercambio de datos a través de las redes de waters_connect.
Obtenga mediciones simultáneas del tamaño, el peso molecular, la distribución y la morfología con el detector Wyatt DAWN MALS flexible junto con los sistemas de cromatografía líquida de Waters, incluido el sistema Arc Premier, aplicables para ácidos nucleicos, LNP y proteínas conjugadas.
Separación del patrón de oligonucleótidos de ARN sintético con oligo(A) de 100 nt (cromatograma negro), ARNm de EPO digerido con RNasa T1 (cromatograma azul) y ARNm de Fluc Beta digerido con RNasa T1 (cromatograma rojo) con un método de LC en IP RP utilizando una columna ACQUITY Premier Oligonucleotide BEH de 300 Å y 1,7 µm. El pico más abundante en la serie de asimetría de poli(A) de ARNm de EPO corresponde a una especie de 124 nt de longitud. El pico más abundante en el grupo de picos de asimetría de poli(A) de ARNm de Fluc Beta corresponde a una especie de 128 nt de longitud.
Efecto de la temperatura en el perfil cromatográfico (selectividad) y el arrastre. Columna: Columna Gen-Pak FAX de 100 x 4,6 mm, 2,5 µm, fase móvil A: TRIS 25 mM, pH = 7,6, fase móvil B: TRIS 25 mM, pH = 7,6 + NaBr 2 M, F = 0,6 mL/min, gradiente: 12-35 % B en 15 min (gradiente superficial), tapón de eluyente de modulador: fase móvil B. Inyección de soportes: 1 µL de tapón previo del modulador + 2 µL de muestra + 1 µL de tapón posterior del modulador. Temperatura: Ambiente (izquierda), 35 °C (centro) y 45 °C (derecha).
(A) Los productos de digestión en las posiciones 623-631(ACAUCCUCGp) y 551-559 (UCACCAUCGp) se predicen y se asignan al mismo pico de RT en el TIC de Gaye et al. No es posible determinar la asignación correcta utilizando la información de masa intacta. (B) Los datos de MSE de la misma inyección se pueden utilizar para aclarar la secuencia correcta para esta asignación. Con la aplicación CONFIRM Sequence de waters_connect, los iones de fragmentos de alta energía se predicen para cada secuencia y se comparan con los clústeres de isótopos de los datos originales integrados mediante un algoritmo personalizado. El software presenta los iones de fragmentos confirmados en un mapa de puntos para evaluar rápidamente la cobertura de la secuencia.
Efecto del pH y la temperatura en la separación de isoformas plasmídicas ΦX174.
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