Mapeo de péptidos

Mapeo de péptidos

Obtenga información inigualable sobre la identificación, la estabilidad y las modificaciones de proteínas con las soluciones de mapeo de péptidos de Waters. Las soluciones de sistemas específicos de Waters integran la preparación de muestras, las columnas, la automatización, la instrumentación y el software con metodología, facilidad de uso, documentación y soporte de aplicaciones, para una mejor resolución de digestiones complejas de proteínas y glicoproteínas con un mayor rendimiento.

Obtenga información inigualable sobre la identificación, la estabilidad y las modificaciones de proteínas con las soluciones de mapeo de péptidos de Waters. Las soluciones de sistemas específicos de Waters integran la preparación de muestras, las columnas, la automatización, la instrumentación y el software con metodología, facilidad de uso, documentación y soporte de aplicaciones, para una mejor resolución de digestiones complejas de proteínas y glicoproteínas con un mayor rendimiento.

Estructura molecular de péptidos en azul
Peptide molecular structure in blue

Descripción general

El mapeo de péptidos es crucial para la caracterización y la monitorización completas de los productos biofarmacéuticos. Obtener una resolución cromatográfica adecuada para separar de forma fiable cada fragmento de digestión requiere métodos robustos y reproducibles con un rendimiento cromatográfico excepcional.

Las soluciones de mapeo de péptidos de Waters combinan la automatización, la preparación de muestras, la separación cromatográfica, la espectrometría de masas y los flujos de trabajo de software generales para ofrecer un análisis sin precedentes de digestiones complejas de proteínas y glicoproteínas con un alto rendimiento. Las soluciones de análisis cuantitativo de Waters dan soporte a una caracterización eficaz, una transferencia de métodos sencilla y una monitorización lista para el cumplimiento normativo en los laboratorios de rutina. Alcance los objetivos de investigación y desarrollo con los flujos de trabajo de mapeo de péptidos sólido y robusto de Waters.


Aplicaciones

La caracterización del mapa de péptidos es esencial para dilucidar la estructura de aminoácidos primaria y los atributos de calidad de las proteínas, incluidos los anticuerpos monoclonales (mAb) y los conjugados de anticuerpo-fármaco (ADC).

Después de la digestión de proteínas, cada péptido posterior proporciona información de la secuencia, el tiempo de retención y la intensidad para confirmar la secuencia de proteínas completa. Waters proporciona potentes flujos de trabajo de hardware y software de espectrometría de masas para comprender las mezclas de digestión complejas y desarrollar metodologías aptas para la transferencia a los laboratorios de rutina.

La caracterización del mapa de péptidos es esencial para dilucidar la estructura de aminoácidos primaria y los atributos de calidad de las proteínas, incluidos los anticuerpos monoclonales (mAb) y los conjugados de anticuerpo-fármaco (ADC).

Después de la digestión de proteínas, cada péptido posterior proporciona información de la secuencia, el tiempo de retención y la intensidad para confirmar la secuencia de proteínas completa. Waters proporciona potentes flujos de trabajo de hardware y software de espectrometría de masas para comprender las mezclas de digestión complejas y desarrollar metodologías aptas para la transferencia a los laboratorios de rutina.



Notas de aplicación

Notas de aplicación

La monitorización de los atributos de péptidos por LC-MS desempeña un papel crucial para garantizar la calidad y la seguridad de los productos bioterapéuticos, y las agencias normativas requieren la confirmación de la estructura deseada del producto para demostrar la comprensión del proceso durante el desarrollo y para fines de liberación de lotes.

Su adopción se está expandiendo a áreas como los métodos de múltiples atributos (MAM), que permiten la monitorización múltiples atributos de calidad del producto (PQA) y atributos de calidad críticos (CQA) en un único análisis. También tiene la capacidad de detectar impurezas y modificaciones desconocidas, como la oxidación, la desamidación, la modificación de la succinimida, la glucosilación, las modificaciones de los terminales C y N, y la isomerización.

La monitorización de los atributos de péptidos por LC-MS desempeña un papel crucial para garantizar la calidad y la seguridad de los productos bioterapéuticos, y las agencias normativas requieren la confirmación de la estructura deseada del producto para demostrar la comprensión del proceso durante el desarrollo y para fines de liberación de lotes.

Su adopción se está expandiendo a áreas como los métodos de múltiples atributos (MAM), que permiten la monitorización múltiples atributos de calidad del producto (PQA) y atributos de calidad críticos (CQA) en un único análisis. También tiene la capacidad de detectar impurezas y modificaciones desconocidas, como la oxidación, la desamidación, la modificación de la succinimida, la glucosilación, las modificaciones de los terminales C y N, y la isomerización.



Notas de aplicación

Notas de aplicación

La detección óptica (como UV) se utiliza a menudo para monitorizar péptidos. Este enfoque se considera el patrón de referencia para las pruebas de identidad y calidad en entornos de garantía de calidad/control de calidad (QA/QC). Los péptidos se pueden monitorizar en función del perfil, la abundancia y el tiempo de retención, que pueden indicar CQA.

Los métodos analíticos reproducibles y robustos requieren una validación exhaustiva, lo que da como resultado una metodología que proporciona información crítica sobre las proteínas bioterapéuticas, ayudando en la caracterización y evaluación de la calidad.

La detección óptica (como UV) se utiliza a menudo para monitorizar péptidos. Este enfoque se considera el patrón de referencia para las pruebas de identidad y calidad en entornos de garantía de calidad/control de calidad (QA/QC). Los péptidos se pueden monitorizar en función del perfil, la abundancia y el tiempo de retención, que pueden indicar CQA.

Los métodos analíticos reproducibles y robustos requieren una validación exhaustiva, lo que da como resultado una metodología que proporciona información crítica sobre las proteínas bioterapéuticas, ayudando en la caracterización y evaluación de la calidad.



Notas de aplicación

Notas de aplicación


Libro electrónico: Mapeo de péptidos para productos bioterapéuticos

El mapeo de péptidos sigue siendo uno de los ensayos más importantes con gran cantidad de datos, que se aplica para la caracterización y la monitorización biofarmacéuticas. Las soluciones que contiene este libro electrónico (desde la preparación hasta la automatización, la separación cromatográfica y la identificación de masas de muestras) proporcionan a los científicos estrategias para ayudar a mejorar y simplificar la difícil tarea del mapeo de péptidos. Por ejemplo, las innovaciones en digestiones trípticas con tripsina RapiZyme, una tripsina recombinante homogéneamente metilada, permiten una mayor velocidad y fidelidad de la digestión y niveles bajos de péptidos derivados de la tripsina a través de su resistencia a la autólisis, pureza y alta actividad para obtener mapas de péptidos más fiables y reproducibles.

El mapeo de péptidos sigue siendo uno de los ensayos más importantes con gran cantidad de datos, que se aplica para la caracterización y la monitorización biofarmacéuticas. Las soluciones que contiene este libro electrónico (desde la preparación hasta la automatización, la separación cromatográfica y la identificación de masas de muestras) proporcionan a los científicos estrategias para ayudar a mejorar y simplificar la difícil tarea del mapeo de péptidos. Por ejemplo, las innovaciones en digestiones trípticas con tripsina RapiZyme, una tripsina recombinante homogéneamente metilada, permiten una mayor velocidad y fidelidad de la digestión y niveles bajos de péptidos derivados de la tripsina a través de su resistencia a la autólisis, pureza y alta actividad para obtener mapas de péptidos más fiables y reproducibles.


Soluciones


Los sistemas LC y LC-MS de Waters ofrecen un rendimiento de separaciones y una sensibilidad líderes para el análisis de mapeo de péptidos.

Los sistemas LC y LC-MS de Waters ofrecen un rendimiento de separaciones y una sensibilidad líderes para el análisis de mapeo de péptidos.

Caracterización y monitorización eficientes de los péptidos durante todo el ciclo de vida del producto

Caracterización y monitorización eficientes de los péptidos durante todo el ciclo de vida del producto

Permita los análisis biofarmacéuticos de LC-MS en todos los laboratorios GxP con el sistema LC-MS BioAccord de Waters, que incluye MS de alta resolución y el software waters_connect para la obtención de informes y el análisis de datos preparados para el cumplimiento normativo.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Capacidad completa de alta resolución para una caracterización y transferencia de métodos fiables

Capacidad completa de alta resolución para una caracterización y transferencia de métodos fiables

Acelere la caracterización y monitorización de múltiples atributos con el sistema de sobremesa HRMS de alto rendimiento Xevo G3 QTof, que proporciona resultados cualitativos y cuantitativos exactos.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Adsorción ultrabaja para una sensibilidad y reproducibilidad máximas

Adsorción ultrabaja para una sensibilidad y reproducibilidad máximas

Elimine la imprevisibilidad de las pérdidas de analitos debidas a interacciones con metales, que pueden ser especialmente pronunciadas con moléculas biológicas, utilizando columnas y sistemas MaxPeak Premier.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Software basado en aplicaciones preparado para el cumplimiento normativo y con conexión en red para optimizar la adquisición de datos, el procesamiento y la generación de informes de datos de LC-MS.

Software basado en aplicaciones preparado para el cumplimiento normativo y con conexión en red para optimizar la adquisición de datos, el procesamiento y la generación de informes de datos de LC-MS.

Simplifique el procesamiento y el análisis de datos

Simplifique el procesamiento y el análisis de datos

Acelere el proceso desde el análisis de muestras hasta la toma de decisiones con waters_connect para productos biofarmacéuticos, que ofrece aplicaciones y flujos de trabajo dedicados para MAM, análisis de masa intacta, confirmación de secuencias y mucho más.

  • Peptide MAM
  • Intact and Subunit MAM
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Simplifique la adquisición, el procesamiento y la generación de informes de datos

Simplifique la adquisición, el procesamiento y la generación de informes de datos

Equipe el laboratorio con el sistema de datos cromatográficos (CDS) de Empower y obtenga una gestión avanzada de datos de laboratorio para los análisis de impurezas, incluida la adquisición, el procesamiento y la generación de informes para instrumentos de cromatografía de líquidos.

  • Peptide Mapping with Optical Detection

Columnas y consumibles que ofrecen un rendimiento de vanguardia en LC y LC-MS para el mapeo de péptidos.

Columnas y consumibles que ofrecen un rendimiento de vanguardia en LC y LC-MS para el mapeo de péptidos.

Maximice la sensibilidad a la vez que se minimiza la adsorción de metales de los péptidos desamidados ácidos

Maximice la sensibilidad a la vez que se minimiza la adsorción de metales de los péptidos desamidados ácidos

Mejore la recuperación y la sensibilidad para péptidos ácidos con las columnas de péptidos ACQUITY, XSelect y XBridge Premier de Waters, que se someten a controles de calidades (QC) por lotes con Cytochrome c Digest Standard de Waters, para aumentar la uniformidad del rendimiento columna a columna. 

  • Reversed-Phase Peptide Columns
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

Logre una digestión de proteínas rápida, limpia y completa.

Logre una digestión de proteínas rápida, limpia y completa.

Logre digestiones rápidas, limpias y completas con mAb en solo 30 minutos con la tripsina RapiZyme, calidad de espectrometría de masas (MS), una enzima altamente activa resistente a la autólisis que reduce la probabilidad de que se produzcan modificaciones artificiales durante la preparación de las muestras antes del análisis por LC-MS.

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

Optimice la preparación de las muestras de mapeo de péptidos

Optimice la preparación de las muestras de mapeo de péptidos

Consiga mapas de péptidos reproducibles y de alta eficacia en menos de 2,5 horas con los kits de digestión de proteínas trípticas PeptideWorks para flujos de trabajo manuales o automatizados, que son 4 veces más rápidos que los métodos caseros habituales y proporcionan una reducción del 78 % en las escisiones omitidas.

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

Compare y valide sus columnas de péptidos con facilidad

Compare y valide sus columnas de péptidos con facilidad

Verifique el rendimiento y monitorice el estado de la columna en su vida útil con los patrones de péptidos de Waters y realice las separaciones de péptidos en cualquier sistema UPLC, HPLC o LC-MS utilizando patrones en paquetes específicamente formulados para minimizar la pérdida de muestra y las discrepancias.

  • Peptide Standards
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

Gane en eficiencia y reduzca el tiempo de espera con las soluciones de automatización de laboratorio verificadas.

Gane en eficiencia y reduzca el tiempo de espera con las soluciones de automatización de laboratorio verificadas.

Mejore la eficiencia y el rendimiento de la preparación de muestras

Mejore la eficiencia y el rendimiento de la preparación de muestras

Optimice la preparación de muestras para los análisis de LC-MS con la automatización y los equipos de laboratorio de Waters, que proporcionan flujos de trabajo verificados para ayudar a minimizar la variabilidad, mejorar la trazabilidad y simplificar la transferencia de métodos.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Está a solo un clic de conseguir el éxito

Está a solo un clic de conseguir el éxito

Optimice la productividad y el éxito de su laboratorio con Waters Global Services para mantener el máximo rendimiento del sistema, minimizar el tiempo de inactividad, abordar los desafíos de las aplicaciones y cumplir con los estrictos requisitos de cumplimiento normativo.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Maximice los recursos y minimice el riesgo con las opciones de pago de Waters Capital, que incluyen la actualización de equipos obsoletos, la obtención de soporte personalizado y la combinación de servicios en un único pago mensual.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Los datos hablan por sí solos

Los datos hablan por sí solos
Comparación del área (%) del sistema ACQUITY UPLC I-Class PLUS y el sistema binario ACQUITY UPLC H-Class PLUS Bio (con mezclador de 340 µL y retardo del gradiente) en cuatro inyecciones. Los datos indican que el área de los picos se conserva entre los sistemas.
El flujo de trabajo de mapeo de péptidos del sistema BioAccord proporciona identificaciones de PTM. La figura muestra el panel de revisión después del procesamiento automatizado de datos. La tabla de componentes contiene: información de la secuencia, m/z y masa neutra, tolerancia de masa, % de abundancia relativa, así como información sobre la fragmentación de cada péptido. La tabla de resumen proporciona una vista concisa de las modificaciones de péptidos seleccionadas en todas las muestras. La consistencia en los tiempos de retención se muestra en el panel inferior izquierdo utilizando los TIC para las inyecciones 1 y 25.
Superposición de IC de inyecciones del estándar de digestión tríptica de mAb con IDC desactivada e IDC activada con umbrales de 5, 10 y 20. La tabla asociada muestra el tamaño total del archivo, el porcentaje de reducción y el tiempo de procesamiento de datos con el sistema de información científica UNIFI.
Perfiles XIC que demuestran el efecto de la química de la superficie de las partículas (BEH y sílice) en las selectividades para péptidos trípticos de mAb NIST seleccionados utilizando fases móviles con 0,1 % de TFA en agua/acetonitrilo. Los cromatogramas se han alineado en función del Tiempo de retención de H38. Los valores de MW y pI para los péptidos (Da) se proporcionan en el recuadro de la tabla. Las identidades de los picos se proporcionan en la Tabla 3.
Abundancia relativa de escisiones omitidas y no específicas para las digestiones de NISTmAb preparadas con los flujos de trabajo manuales y automatizados de PeptideWorks y un kit de tripsina inmovilizada principal. Las barras de error representan una desviación estándar. PeptideWorks proporciona una digestión más completa y específica.
Digestiones con relación enzima-proteína 1:5 de Remicade, destacando la limpieza de la línea base con tripsina RapiZyme (azul) frente a un competidor líder en la industria (negro). El eje Y es el % de intensidad de TIC.

Seminarios web y recursos


Método de péptidos con múltiples atributos (MAM) en el sistema LC-MS BioAccord con SmartMS
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  • eBook
  • Nota técnica

Mapeo de péptidos para productos bioterapéuticos

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  • Infografía

La digestión de proteínas se vuelve inteligente

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  • Infografía

RapiZyme: Rápida, limpia y completa

RapiZyme: Rápida, limpia y completa
  • Infografía

RapiZyme: Uso flexible

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  • Póster

Mejora de los flujos de trabajo de mapeo de péptidos biofarmacéuticos utilizando una nueva enzima de tripsina resistente a la autólisis

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Nuevo método automatizado de preparación de muestras para el mapeo de péptidos

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Garantice el cumplimiento de los estándares de calidad y desarrollo de fármacos con las soluciones líderes de Waters para la purificación, caracterización y monitorización de péptidos sintéticos a escala de laboratorio, como el péptido similar al glucagón 1 (GLP-1).

Evaluar la identidad de las proteínas, las glicoformas y las modificaciones con técnicas de espectrometría de masas de subunidades y masa intacta en soluciones de Waters para comprender las estructuras de las proteínas y avanzar en la investigación biofarmacéutica.

Obtenga más información sobre las soluciones de mapeo de péptidos

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