Columnas de HPLC preparativa
Aumente el rendimiento a través de la productividad y la predicibilidad a escala preparativade analitos basados en moléculas pequeñas, proteínas, péptidos y ácidos nucleicos.
Como científico que trabaja en la investigación, el desarrollo y la comercialización de fármacos diagnósticos o terapéuticos, puede ser un desafío crear métodos que sean robustos, escalables y que proporcionen un alto rendimiento y pureza en diversas plataformas de LC preparativa.
A medida que el laboratorio trabaja para lograr separaciones rápidas y eficientes a escala de laboratorio y para conseguir un mayor rendimiento, las columnas HPLC preparativas de Waters pueden ayudarlo a lograr un rendimiento predecible y a escalar fácilmente desde el cribado UPLC, UHPLC o HPLC hasta la purificación a escala de laboratorio. Con el diseño patentado de densidad de lecho óptima (OBD) de las columnas preparativas HPLC de Waters, se puede garantizar la consistencia en el rendimiento de columna a columna y aumentar la productividad a través de recuperaciones más altas y columnas con vidas útiles más prolongadas, lo que hace que perder muestras, repetir análisis de purificación y enfrentarse a una deficiente escalabilidad de columnas de pequeño a gran volumen sean cosas del pasado.
Las columnas preparativas OBD XBridge y XSelect específicas ahora están disponibles en el hardware de tecnología HPS MaxPeak en tamaños de partícula de 2,5, 3,5 y 5 µm. Las columnas preparativas MaxPeak Premier OBD evitan interacciones no deseadas de compuesto/superficie, que dan lugar a formas/purezas deficientes de los picos, baja sensibilidad y pérdida de muestra objetivo.
Columnas HPLC preparativas
Especificaciones
Descripción general
- Logre separaciones rápidas y eficientes a escala de laboratorio para un mayor rendimiento
- Escale directamente desde el cribado de UPLC, UHPLC o HPLC hasta la purificación a escala de laboratorio
- Seleccione partículas cromatográficas robustas diseñadas para la purificación
- Aumente la productividad a través de mayores recuperaciones y columnas con una vida útil más prolongada.
Uso recomendado: Para purificación por HPLC a escala de laboratorio.
Columnas preparativas OBD de Waters
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Alta estabilidad de temperatura y pH -
Mayor carga de masa para compuestos básicos
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Aumente la vida útil de la columna con la tecnología OBD
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Escalabilidad directa de analítico a preparativo
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Ventajas de la tecnología de partículas BEH
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Tamaños de poro: 130 Å y 300 Å
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Tamaños de partícula: 2,5 µm, 3,5 µm, 5 µm y 10 µm
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Químicas específicas de aplicación para: proteínas, péptidos y oligonucleótidos
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Simplifica la transferencia de métodos entre laboratorios
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Sometida a controles de calidad para aplicaciones de péptidos, proteínas y oligonucleótidos
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Disponible con la tecnología HPS MaxPeak Premier
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Excelente estabilidad de pH
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Diseñadas para la selectividad
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Rendimiento mejorado con cargas de masa alta
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Aumente la vida útil de la columna con la tecnología OBD
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Escalabilidad de columnas preparativas más grandes a más pequeñas
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Ventajas de la tecnología híbrida de superficie cargada (CSH)
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Tamaños de poro: 130 Å
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Tamaños de partícula: 3,5 µm, 5 µm y 10 µm
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Químicas específicas de aplicación para: péptidos
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Reduce el consumo de eluyente y los volúmenes de fracciones
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Ideales para un rápido desarrollo de métodos
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Sometidas a controles de calidad por lotes con digestión de proteínas complejas
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Disponible con la tecnología HPS MaxPeak Premier
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Estabilidad de pH bajo
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Elevada carga de masa
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Fácil escalado de analítico a preparativo
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Rendimiento y longevidad superiores de la columna con la tecnología OBD
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Tamaños de partícula: 5 µm y 10 µm
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Producidas bajo un estricto control de la síntesis y del relleno de la columna
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Diseñadas para más de 1000 inyecciones de DMSO
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Fases móviles de pH bajo
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Vida útil de la columna más larga con la tecnología OBD
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Mayor capacidad de carga
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Retención óptima de compuestos polares
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Compatibles con fases móviles 100 % acuosas
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Tamaños de partícula: 5 µm y 10 µm
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Excelente estabilidad química para purificaciones a pH alto y bajo
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Transición directa de la generación de compuestos principales a la optimización de compuestos principales en el desarrollo de fármacos
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Formas de pico excelentes para compuestos básicos
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Mayor carga de masa, hasta 60 veces más en comparación con los materiales convencionales a base de sílice
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Tecnología de partículas híbridas
Aumente la vida útil de la columna preparativa con la tecnología OBD
La vida útil de las columnas HPLC preparativas no debe ser aleatoria. Con el amplio desarrollo del hardware de la columna y el proceso de empaquetado para las columnas preparativas OBD, Waters ha logrado una densidad uniforme predecible en toda la columna y ha maximizado la estabilidad mecánica. Estas columnas con una vida útil prolongada y alta carga de masa dan lugar a una mayor productividad para nuestros clientes, que han llegado a confiar en la alta pureza y recuperación que pueden obtener con estas columnas. Los científicos seleccionan las columnas preparativas OBD por su robustez, rendimiento predecible y facilidad de escalado desde escala analítica hasta preparativa.
Evite fugas con el diseño de las columnas preparativas OBD
Evite fugas a altas presiones de funcionamiento con las columnas OBD preparativas, que están diseñadas para incorporar un par de distribuidores especialmente diseñados y juntas químicamente inertes.
Escale directamente los métodos de UPLC a columnas HPLC preparativas
El escalado correcto de los métodos desde las dimensiones analíticas hasta las preparativas requiere el uso de columnas cromatográficamente equivalentes. Es muy frecuente observar que, incluso cuando se utiliza la misma fase química y el mismo tamaño de partícula, los métodos no escalan debido a la pérdida de resolución o a una carga inferior a la esperada. Al hacer coincidir las densidades del lecho de la columna analítica y preparativa, es posible garantizar la escalabilidad. Las columnas preparativas OBD se compactan a densidades del lecho que se asemejan mucho a las de la columna analítica equivalente, lo que proporciona una excelente estabilidad, reproducibilidad y eficacia.
Descubra la capacidad de carga de masa de las columnas preparativas OBD
La capacidad de masa de las columnas preparativas puede verse afectada por muchos factores. En general, la capacidad de carga de masa suele ser mayor para el material fuertemente retenido, mayor para las mezclas simples y menor cuando se requiere una mayor resolución y depende en gran medida de las condiciones de carga. Si desea obtener instrucciones más detalladas sobre el escalado, consulte nuestra Calculadora de columnas preparativas OBD.
Simplifique el aislamiento y la purificación de péptidos
Las separaciones impredecibles, la vida útil corta de la columna y la falta de escalabilidad pueden dificultar el aislamiento y la purificación de los péptidos. Las columnas de péptidos ofrecen una química de superficie estable que puede aplicarse a la mayoría de los péptidos. Para escalar la separación optimizada, se necesitan una química y un rendimiento de la columna idénticos en una amplia variedad de dimensiones de columna. Con el diseño de la columna preparativa OBD y la química de superficie estable de las columnas de péptidos de Waters, en partículas de diversos tamaños, se puede mejorar la eficacia de los procesos de purificación y aislamiento de péptidos, y reducir los costos en general. Si desea obtener más información, consulte nuestros Métodos prácticos para el aislamiento de péptidos.
Purificación de oligonucleótidos altamente eficiente y reproducible con mejores rendimientos y tiempo de respuesta
La tecnología de partículas híbridas con puentes de etileno (BEH) certificada por lotes de Waters para oligonucleótidos garantiza un mayor rendimiento, reproducibilidad y escalado para la purificación. Las altas temperatura y el pH elevado son estrategias frecuentes para minimizar las interacciones secundarias en la separación y purificación de oligonucleótidos. La tecnología de partículas BEH resiste las condiciones más duras, como pH y temperatura elevados, y los aditivos que normalmente se requieren para el trabajo con oligonucleótidos.
Las columnas de preparación OBD para oligonucleótidos XBridge, probadas por lotes y con certificación de control de calidad, proporcionan una garantía adicional para la reproducibilidad y la transferencia de métodos, y asisten a las necesidades de purificación emergentes para siRNA, ASO y reactivos de oligonucleótidos estándar y nuevos químicamente diversos. Cada lote de sorbente BEH C18 de oligonucleótidos se somete a pruebas de control de calidad y se selecciona utilizando el estándar de oligonucleótidos MassPrep de Waters y una evaluación rigurosa de la resolución y de la asimetría de los picos a partir de una separación IP-RP con acetato de trietilamonio. Estos sorbentes cuidadosamente examinados están disponibles en tamaños de partícula de 2,5 y 5 µm, así como en tamaños de poro de 130 y 300 Å, para proporcionar a los químicos de oligonucleótidos la gama de opciones versátiles que necesitan para purificar una variedad de diferentes productos de síntesis. Guía de la solución de purificación de oligonucleótidos
Prolongue la vida útil de las columnas con precolumnas preparativas
El uso de precolumnas preparativas prolongará en gran medida la vida útil de las columnas preparativas. Las precolumnas se instalan fácilmente delante de la columna preparativa y proporcionan una protección superior. Los soportes de precolumnas preparativas y los conjuntos de cartucho de Waters están disponibles en una longitud de 10 mm y en cuatro diámetros internos diferentes, de 7,8, 10, 19 y 30 mm. Estos soportes de precolumna y estos conjuntos de cartucho protegen las columnas preparativas OBD de Waters con el mismo diámetro interno, como se muestra en las siguientes opciones:
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Las columnas y los componentes de HPLC preparativa son elementos especializados diseñados para la purificación y el aislamiento de compuestos a mayor escala en comparación con la HPLC analítica. Estas partes integrales desempeñan un papel fundamental para garantizar separaciones eficaces y obtener fracciones de alta pureza en la cromatografía preparativa. A continuación se muestra una descripción detallada:
Columnas HPLC preparativas:
-Variedad de tipos de columnas: disponibles en fase reversa, fase normal, intercambio iónico, exclusión por tamaño y tipos de afinidad; la selección depende de la naturaleza de la muestra y del mecanismo de separación deseado.
-Dimensiones de la columna: diferenciadas por sus dimensiones más grandes, que incluyen mayor longitud y diámetro, las columnas de HPLC preparativa permiten cargas de muestra más altas y una mejor resolución en comparación con sus equivalentes analíticos.
Material de relleno de la columna:
-Fase estacionaria crítica: el papel de la fase estacionaria en las columnas preparativas es fundamental para lograr separaciones correctas. Puede estar compuesta por materiales a base de sílice, polímeros u otros materiales adaptados para aplicaciones específicas.
-Tamaño de partícula optimizado: a diferencia de las partículas más pequeñas que ofrecen una mayor resolución en las columnas analíticas, las columnas preparativas suelen utilizar partículas más grandes para manejar mayores cargas de muestra sin incurrir en una contrapresión excesiva.
Partes de la HPLC preparativa:
-Precolumnas de protección: protegen la columna preparativa primaria frente a la contaminación y prolongan su vida útil, ya que capturan las impurezas antes de que lleguen a la columna analítica.
-Hardware de columna resistente: estos componentes, que abarcan el alojamiento de la columna, los conectores y las conexiones, están diseñados para soportar las presiones elevadas asociadas con la cromatografía preparativa.
Fritados y filtros: componentes esenciales que ayudan a retener la fase estacionaria dentro de la columna y evitan la entrada de partículas en el sistema HPLC.
Sistemas de HPLC preparativa:
-Carga automatizada de muestras: los sistemas de HPLC preparativa, que suelen integrar funciones de carga automatizada de muestra, garantizan la precisión y la reproducibilidad al inyectar volúmenes de muestra más grandes en la columna.
-Colectores de fracciones eficientes: los sistemas automatizados agilizan el proceso de aislamiento mediante la recogida eficaz de las fracciones purificadas.
Cuidado y mantenimiento de la columna:
-Procedimientos de limpieza de rutina: esencial para mantener un rendimiento óptimo y prolongar la vida útil de la columna, la limpieza habitual de las columnas preparativas está determinada por la naturaleza de la muestra y el tipo de fase estacionaria.
-Monitorización de la contrapresión: la monitorización y el control de la contrapresión, cruciales en la cromatografía preparativa, evitan daños en la columna y garantizan separaciones eficientes.
Consideraciones de aplicación:
-Compatibilidad de la muestra: es fundamental examinar propiedades como la solubilidad, la estabilidad química y la compatibilidad con la fase estacionaria elegida.
-Estrategias de optimización: parámetros como el caudal, la composición de la fase móvil y el perfil del gradiente se adaptan a aplicaciones específicas.
La selección cuidadosa y el mantenimiento de las columnas y piezas de HPLC preparativa contribuyen significativamente a la purificación exitosa de grandes cantidades de compuestos en diversas aplicaciones, incluido el desarrollo farmacéutico, la investigación de productos naturales y los procesos industriales.
Preguntas frecuentes sobre las columnas y las piezas de HPLC preparativa
1. ¿Cómo selecciono la columna de HPLC preparativa adecuada para mi aplicación?
Elegir la columna de HPLC preparativa correcta es un aspecto importante que depende de varios factores. En primer lugar, identificar el tipo de muestra con la que se está trabajando, como proteínas, péptidos o moléculas pequeñas. El tamaño de partícula y el tamaño de poro de la columna son fundamentales para lograr la resolución y la capacidad de carga deseadas. Para separaciones de alta resolución, los tamaños de partícula más pequeños son ideales, mientras que las partículas más grandes pueden ser mejores para capacidades de carga más altas.
Además, hay que tener en cuenta la escala de la purificación: se necesitan columnas más grandes para volúmenes más altos. Waters ofrece una gama de columnas optimizadas para diferentes aplicaciones, por lo que es esencial satisfacer sus necesidades específicas con la columna adecuada para obtener resultados óptimos.
2. ¿Cómo mantengo la longevidad de mi columna de HPLC preparativa?
La manipulación adecuada y el mantenimiento habitual no son negociables para mantener la longevidad de su columna de HPLC preparativa. Esto comienza siempre con el uso de eluyentes y tampones de alta calidad para evitar la contaminación y la acumulación. Después de cada uso, enjuague la columna con un eluyente adecuado para eliminar las muestras residuales y evitar obstrucciones.
Almacene la columna en un eluyente adecuado para mantener la estabilidad del material de relleno y evite la exposición a presiones y temperaturas extremas que puedan dañar la columna. La monitorización habitual del rendimiento de la columna, como la comprobación de los aumentos de presión o de los cambios en la resolución, puede ayudar a identificar problemas de forma temprana y prolongar la vida útil de la columna.
3. ¿Cuál es la importancia del tamaño de partícula y el tamaño de poro en las columnas de HPLC preparativa?
Los tamaños de partícula más pequeños generalmente proporcionan una mayor resolución, lo que permite una mejor separación de compuestos estrechamente relacionados. Sin embargo, también pueden dar lugar a una mayor contrapresión, que debe controlarse. El tamaño de poro determina el tamaño de las moléculas que se pueden separar de forma eficaz. Para biomoléculas más grandes, como las proteínas, se necesitan poros más grandes para evitar la exclusión y asegurar una separación eficiente. Comprender el equilibrio entre el tamaño de partícula y el de poro es esencial para optimizar el rendimiento de la columna, lograr una alta pureza y mantener la eficacia del proceso preparativo.
