Um ressurgimento no desenvolvimento da terapêutica de oligonucleotídeos gerou a criação de pipelines em todo o setor. Atuando no nível da transcrição e tradução de genes, esses fármacos de ácidos nucleicos curtos são muito promissores para muitos distúrbios hereditários e doenças comuns.
As ferramentas e técnicas de LC-MS da Waters têm um papel extremamente importante na confirmação da identidade e da pureza desses fármacos, bem como na quantificação da presença deles em biofluidos.
Estudo de caso: BioSpring implementa rotinas de trabalho de LC-MS da Waters para oligonucleotídeos para expandir o portfólio atual
As colunas e os sistemas MaxPeak Premier eliminam a imprevisibilidade das perdas de analitos devido a interações com metais, que podem ser especialmente acentuadas com oligonucleotídeos carregados negativamente.
Simplifique a análise de biofármacos de LC-MS de alto desempenho para todos os usuários com o Sistema Waters BioAccord LC-MS com ACQUITY Premier, uma plataforma integrada e pronta para conformidade que pode ser implementada desde a descoberta até os laboratórios GxP.
Acelere a caracterização de oligonucleotídeos sintéticos com o sistema de bancada HRMS de alto desempenho do Xevo G3 QTof, que fornece resultados qualitativos e quantitativos exatos.
Expanda o escopo da análise de sensibilidade máxima com a Espectrometria de Massas triplo quadrupolo do Waters Xevo TQ Absolute, que fornece níveis inéditos de confiabilidade, reprodutibilidade e desempenho para suas aplicações de oligonucleotídeos.
Teste da inércia do Sistema ACQUITY Premier UPLC e da Coluna ACQUITY Premier OST utilizando o oligômero de 21 nt: cromatograma UV com a menor concentração detectável (0,5 nM ou 5 femtomoles do oligonucleotídeo de 21 mer carregado na coluna) comparado com a injeção em branco anterior.
Curvas de calibração de GEM91 utilizando uma coluna de aço inoxidável e um sistema convencional (vermelho), uma Coluna ACQUITY Premier e um sistema convencional (azul) e uma Coluna ACQUITY Premier e um sistema (roxo). Os diferentes gradientes indicam diferenças notáveis na recuperação utilizando as colunas e os sistemas testados.
Cromatogramas TUV e TIC mostrando o desempenho do Sistema BioAccord quando o padrão de OST de 1 μM foi diluído 100 vezes (carregamento de amostra de 100 fmoles). Os cinco oligonucleotídeos principais são detectados claramente nos cromatogramas UV e TIC, indicando que o sistema e o método de LC-MS têm sensibilidade adequada para detectar impurezas de oligonucleotídeo de baixo nível.
A confirmação da sequência de escada completa de LC-MS/MS para a sequência de ssRNA de 5'-UCGUCAAGCGAUUACAAGGTT-3' foi obtida. O experimento foi conduzido utilizando o pico de M4 como o íon precursor. As atribuições de pico de fragmentação foram feitas pela correspondência com as massas teóricas utilizando cálculos simples de arquivos do Excel. MaxEnt3 foi utilizado para deconvolução e deisotoping de carga.
