寡核苷酸逆相管柱

寡核苷酸逆相管柱

Waters寡核苷酸逆相管柱應用於寡核苷酸表徵分析與不純物分析,能夠發揮業界領先的pH值/溫度耐受性及優異的解析度。每批吸附劑均經寡核苷酸標準品的品管(QC)檢驗,批次間效能與再現性確實有保障。

Waters寡核苷酸逆相管柱應用於寡核苷酸表徵分析與不純物分析,能夠發揮業界領先的pH值/溫度耐受性及優異的解析度。每批吸附劑均經寡核苷酸標準品的品管(QC)檢驗,批次間效能與再現性確實有保障。


概述

離子對逆相(IPRP)層析是用於合成寡核苷酸表徵分析和不純物分析的理想方法。相較於包括陰離子交換(AEX)、HILIC及SEC在內的任何其他層析技術,這個方法更能協助科學家解析合成及製程相關不純物。這項技術也有其難度。有很多因素可以直接影響分離效能和再現性,包括離子對試劑的純度和穩定性、對層析硬體的非特異性吸附,以及吸附劑的批次間差異。IPRP需靠高pH值和高溫條件才能展現理想的分離效果,因此,管柱材料必須能耐受高pH值和高溫。

Waters寡核苷酸逆相管柱具以下特點,能提高分析結果的可信度:

  • 採用BEH C18雜化矽膠顆粒技術,解析度和管柱使用壽命優異,能發揮業界領先的pH值和溫度穩定性。
  • 採用MaxPeak Premier高效能表面(HPS)技術,能大幅減少非特異性吸附(NSA),從而大幅提升靈敏度、再現性和生產力。
  • 寡核苷酸品管檢驗能確實保障批次間分離效能與再現性。


靈敏度和再現性更高,而且不需要活化管柱

靈敏度和再現性更高,而且不需要活化管柱

核酸(包括寡核苷酸)是聚陰離子(帶負電荷),很容易吸附於不鏽鋼管柱的金屬氧化物表面。Waters MaxPeak Premier寡核苷酸分析管柱採用惰性雜化有機/無機矽膠表面化學材料,能消除絕大部分的核酸NSA,因而能提高靈敏度、再現性和生產力。 Waters支援實驗室省去耗時的分析前管柱鈍化與樣品活化步驟。

發揮出色的合成寡核苷酸解析度

發揮出色的合成寡核苷酸解析度

合成寡核苷酸的IP-RP層析分離能依據大小、電荷和疏水性的細微變化解析樣品成分。Waters ACQUITY(UPLC:1.7 µm粒徑大小)和XBridge(HPLC/UHPLC:2.5 µm粒徑大小)Premier BEH C18寡核苷酸分析管柱能發揮優異的寡核苷酸樣品解析度、靈敏度和再現性。

管柱使用壽命表現優異

管柱使用壽命表現優異

Waters ACQUITY和XBridge Premier寡核苷酸分析管柱填充Waters BEH(乙烯架橋雜化)C18雜化矽膠顆粒,在高pH值和高溫條件下,不但管柱使用壽命長,分離效能也十分出色。

解決方案


適用於超快速分離的2.1 x 20 mm管柱

適用於超快速分離的2.1 x 20 mm管柱

寡核苷酸和較長的核酸會表現出強烈的鍵結/解離與沖提機制,因此相當適合「彈道式梯度」和超快速分離,能提升高通量檢測實驗室的生產力。Waters ACQUITY Premier BEH C18 2.1 x 20 mm寡核苷酸分析管柱分130 Å和300 Å兩種孔隙,分別能針對短鏈寡核苷酸(10–40 nt)和長鏈寡核苷酸(> 40 nt)進行超快速分離。

  • Ultrafast Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

MaxPeak Premier寬孔隙(300 Å)管柱,適用於長鏈寡核苷酸

MaxPeak Premier寬孔隙(300 Å)管柱,適用於長鏈寡核苷酸

ACQUITY (1.7 µm)和XBridge (2.5 µm) Premier寡核苷酸分析管柱皆提供130 Å和300 Å兩種孔隙大小,因寡核苷酸長度而異,滯留性和峰型清晰度也各有不同。130 Å孔隙大小顆粒的表面積加大,用於短鏈(< ~40 mer)寡核苷酸能發揮更好的滯留性和解析度;而300 Å孔隙大小顆粒則能讓較長鏈(> ~40 mer)的寡核苷酸擴散成效更好、解析度更高。

  • Long-mer Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

能發揮基準測試效能的寡核苷酸/核酸標準品

能發揮基準測試效能的寡核苷酸/核酸標準品

Waters提供一系列優質且可追溯批號的分析標準品,這些標準品與寡核苷酸逆相管柱相輔相成,有助於進行系統適用性測試、方法開發以及狀況排除。這些標準品包括:Waters MassPREP寡核苷酸標準品(含15-35mer oligodT分子量標準品),適用於所有Waters品牌寡核甘酸管柱的品管檢查流程;20mer ssDNA標準品,適用於LC-MS/MS碎片和序列基準分析;脂質共軛且高度修飾的反義寡核苷酸(ASO)、ssDNA和dsDNA分子量標準品等。

  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

能延長管柱使用壽命的VanGuard FIT管柱

能延長管柱使用壽命的VanGuard FIT管柱

ACQUITY和XBridge Premier BEH C18寡核苷酸分析管柱均提供適用於VanGuard FIT管柱的規格,包括一個一體成形的5 mm保護柱匣,其中充填了相同的吸附劑,能發揮防止分析管柱積垢的作用。一體成形設計,完全不影響樣品解析度。倘若管柱匣結垢,很容易就能更換管柱匣,充分延長分析管柱使用壽命。

  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

應用

Waters發表了30份以上的應用手冊,介紹本公司技術前沿的治療與診斷用液相層析和質譜分析工具在寡核苷酸表徵分析與不純物分析中的應用。以下近期範例突顯出我們在應用領域具備的深厚專業知識,以及新穎先進的工具。

Waters發表了30份以上的應用手冊,介紹本公司技術前沿的治療與診斷用液相層析和質譜分析工具在寡核苷酸表徵分析與不純物分析中的應用。以下近期範例突顯出我們在應用領域具備的深厚專業知識,以及新穎先進的工具。


應用手冊

應用手冊

小分子干擾RNA (siRNA)寡核苷酸治療藥物是雙鏈RNA,在分析方面有其特殊難度。下列應用手冊說明非變性和變性層析分離處理。

小分子干擾RNA (siRNA)寡核苷酸治療藥物是雙鏈RNA,在分析方面有其特殊難度。下列應用手冊說明非變性和變性層析分離處理。


應用手冊

應用手冊

診斷和治療用寡核苷酸的核苷酸序列對其特異性和功能影響重大,因此一定要準確確認其序列。LC-MS工作流程支援100%確認寡核苷酸序列,能發揮鑑定序列中的修飾核苷酸並確認位置的獨特能力,且一體適用於合成寡核苷酸與長鏈核酸的核酸酶分解物產生的寡核甘酸(例如mRNA或ssDNA寡核苷酸圖譜分析工作流程)。

診斷和治療用寡核苷酸的核苷酸序列對其特異性和功能影響重大,因此一定要準確確認其序列。LC-MS工作流程支援100%確認寡核苷酸序列,能發揮鑑定序列中的修飾核苷酸並確認位置的獨特能力,且一體適用於合成寡核苷酸與長鏈核酸的核酸酶分解物產生的寡核甘酸(例如mRNA或ssDNA寡核苷酸圖譜分析工作流程)。


應用手冊

應用手冊

mRNA治療藥物和疫苗的關鍵品質屬性包括:確認polyA尾的長度和多分散性,以及5'端帽的鑑定與任何可能的低濃度異構物。下列應用手冊示範如何運用離子對逆相層析技術進行這類分析。

mRNA治療藥物和疫苗的關鍵品質屬性包括:確認polyA尾的長度和多分散性,以及5'端帽的鑑定與任何可能的低濃度異構物。下列應用手冊示範如何運用離子對逆相層析技術進行這類分析。


應用手冊

應用手冊

在藥物開發過程中,從早期藥物研究到後期開發,都必須用到經過適當純化的寡核苷酸材料,以利進行各種不同的研究及改善純化製備方案。本應用手冊介紹一種符合成本效益且高通量的系統化方法,適用於20-mer寡核苷酸的分析級分離與製備級純化方案。

在藥物開發過程中,從早期藥物研究到後期開發,都必須用到經過適當純化的寡核苷酸材料,以利進行各種不同的研究及改善純化製備方案。本應用手冊介紹一種符合成本效益且高通量的系統化方法,適用於20-mer寡核苷酸的分析級分離與製備級純化方案。


應用手冊

應用手冊


數據不證自明

數據不證自明
使用ACQUITY Premier BEH C18 300 Å寡核苷酸分析管柱連續四次進樣3 µL的Duplex C (0.40 mg/mL)。
25 mg純化分析的餾分純度測定。
以點圖格式呈現高能量MSE非標靶碎裂產生的完整(100%)序列覆蓋率。
使用ACQUITY Premier 2.1 x 20 mm寡核甘酸分析超短管柱,在F = 1.5 mL/min及T = 70 °C的條件下以1.33分鐘的凹型(對數)梯度分析得到的實驗層析圖。

網路研討會與資源


  • 掛圖

LC與LC-MS生物分離消耗品 – 掛圖

LC與LC-MS生物分離消耗品 – 掛圖
  • 資訊圖表

ACQUITY Premier寡核苷酸分析管柱 – 資訊圖表

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  • User Manuals

ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier BEH C18寡核苷酸分析管柱保養與使用手冊

ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier BEH C18寡核苷酸分析管柱保養與使用手冊
  • User Manuals

寡核苷酸分離處理技術標準品保養與使用手冊

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  • 電子書

寡核苷酸純化製備產

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  • 電子書

定量寡核苷酸產品型錄

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深入瞭解寡核苷酸逆相管柱。

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