分離模式

逆相層析

逆相層析是現在應用於實驗室最熱門的液相層析分離技術，其熱門程度從Waters目前提供的各種管柱產品中即可體現。

簡單來講，逆相層析採用極性移動相，一般是水或緩衝液與極性溶劑（例如甲醇、乙腈或四氫呋喃）的混合物，以及非極性固定相，例如與矽膠或雜化載體鍵結的長鏈碳氫化合物。近年來，人們將目光鎖定分離介質領域，並開展了大量研究與開發工作，旨在改善管柱效率、pH穩定性，以及提供替代選擇性。

Waters提供的現代管柱充填材料可以約略區分成三種類別：

• 雜化 – 專為實現最高的pH穩定性所設計，以提供最具彈性的方法開發選項。提供XBridge、ACQUITY BEH與XTerra品牌；pH範圍1–12。
• 矽膠 – 以前最常用的逆相載體：SunFire與Symmetry產品，使用Waters Taunton製造廠的原物料合成，旨在發揮最高的載樣量；pH範圍2–7。
• 特定應用 – 設計目標是特定的應用領域，例如專為強化極性分子滯留性所設計的Atlantis管柱。

正相層析

在開發出逆相鍵結相之前，正相層析是最熱門的分離技術。該技術仰賴分析物與極性官能基在固定相表面的交互作用，使用非極性溶劑做為移動相時，交互作用最強烈。

正相層析是一種功能非常強大的分離工具，因為可以使用各種溶劑精確調整分離的選擇性。然而，由於存在一定的複雜性，也造成許多層析人員不願採用。在某些情況下，可能會遭遇平衡時間長或再現性問題，主要是因為該技術對移動相內所含的低濃度極性污染物非常敏感。如果可以控制這些問題，由於常用溶劑的黏性低，該技術獲得的層析圖通常優於逆相方法。

正相管柱有SunFire、Nova-Pak與Spherisorb產品系列。

HILIC（親水作用層析）

親水作用層析已經使用很長的時間，但HILIC一詞直到最近才變得常用。該技術適用的分析物是極性很強的化合物，例如極性代謝物、碳水化合物或胜肽。

HILIC可以視為正相層析進入水性移動相的延伸。移動相是水或緩衝液(< 40%)與有機溶劑的混合物。固定相是親水性極強的極性吸附物質，例如矽膠、極性鍵結相、極性聚合物填料與離子交換劑。所有這些固定相的共同點是，它們都很容易吸附水，因此歸類為「親水性」固定相。

HILIC模式所應用的梯度方法與逆相模式正好相反。HILIC模式的初始條件為高濃度有機物（通常是95%），然後逐漸移向較高含量的水相。因此，該模式也常用「逆逆相」一詞指稱。

該技術逐漸普遍，因此成為愈來愈多管柱充填材料研究的主題。

Waters HILIC管柱目前有Atlantis、CORTECS、XBridge與ACQUITY產品系列。