Kit per l’analisi di rilascio degli N-glicani GlycoWorks RapiFluor-MS
Rivelazione rapida, sensibile e semplice degli N-glicani
Immaginate un nuovo workflow per l’analisi di rilascio degli N-glicani con gli appositi kit GlycoWorks RapiFluor-MS. Con la tecnologia alla base di questi kit, è possibile ottenere prestazioni di spettrometria di massa e fluorescenza senza precedenti per la rivelazione dei glicani, migliorando al contempo la produttività della preparazione del campione N-glicani.
Con i kit GlycoWorks RapiFluor-MS per gli N-glicani non è necessario scendere a compromessi tra velocità e sensibilità nella preparazione dei campioni e i risultati analitici saranno più affidabili.
Kit GlycoWorks
Specifiche
Panoramica
- Sono ora disponibili i kit di etichettatura ecocompatibile GlycoWorks RapiFluor-MS senza DMF! Il sistema DMSO, un'alternativa più ecologica al DMF, sostituisce il DMF nei kit standard. (entrambe le versioni continueranno a essere disponibili).
- Ottenete una sensibilità senza precedenti per la spettrometria di massa e fluorescenza
- Risparmiate tempo con un workflow semplificato e riproducibile di 30 minuti in 3 passaggi
- Massimizzate la produttività con l’automazione su più piattaforme
- Acquisite informazioni preziose dalla caratterizzazione al monitoraggio in routine con un’unica etichetta
- Riducete le preparazioni dei campioni complicate e dispendiose in termini di tempo
- Supportate metodi 2-AB precedenti con kit dedicati e fornite un facile passaggio a RFMS e una formazione adeguata agli analisti
- Completate il flusso di lavoro con le colonne per glicani e gli Standard e tamponi Waters
Uso consigliato: per un’analisi degli N-glicani rapida, efficiente e accurata.
Intestazione Caratteristiche
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Modulo di deglicosilazione: PNGase F rapida, tampone personalizzato, surfattante RapiGest SF e standard di controllo della massa intatta degli MAb come benchmark del protocollo -
Modulo di marcatura: reagente e solvente per reagenti RapiFluor-MS(DMF o DMSO)
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Modulo di purificazione: piastra µElution GlycoWorks HILIC*, tampone di eluizione e diluente campione GlycoWorks
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Modulo di raccolta dei campioni: tubi, tappi, vassoio di raccolta e vassoio di scarico necessari per gestire i campioni
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Dispositivi di purificazione dei campioni con sorbente HILIC (amminopropilico)
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Alta produttività: piastra µElution GlycoWorks HILIC SPE* (96 pozzetti)
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Monouso: cartucce GlycoWorks HILIC da 1 cc (confezione da 20) e GlycoWorks HILIC da 1 cc Flangeless per il collettore a pressione positiva (confezione da 20)
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Kit di reagenti GlycoWorks con materiale per la deglicosilazione proteica e la marcatura
* È necessario un collettore sottovuoto o un elaboratore a pressione positiva per la piastra µElution.
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In risposta alle nuove normative che limitano l’uso della dimetilformammide (DMF), sono disponibili kit di etichettatura GlycoWorks RapiFluor-MS per N-glicani senza DMF con dimetilsolfossido (DMSO) come solvente di etichettatura.
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Raggiungi la stessa impareggiabile sensibilità per la fluorescenza e la spettrometria di massa dei kit convenzionali contenenti DMF
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Stesso workflow di 30 minuti in 3 fasi in combinazione con i kit di deglicosilazione e purificazione
Risparmio di tempo con un workflow semplificato di 30 minuti su 3 passaggi
Aumento del segnale di fluorescenza e MS con riduzione del tempo di preparazione del campione
L’etichetta RapiFluor-MS migliora la quantificazione mediante fluorescenza, con un’intensità del segnale degli spettrometri di massa senza precedenti. Assegnate e caratterizzate facilmente i glicani a bassa abbondanza mediante la rivelazione seriale di fluorescenza e spettrometria di massa, utilizzando meno campione e ottenendo comunque una maggiore sensibilità.
Quando i glicani marcati sono stati analizzati mediante cromatografia HILIC, l’etichetta RapiFluor-MS ha prodotto i seguenti risultati:
- Analogo commerciale per marcatura rapida di aminobenzamide (AB); segnale di fluorescenza 2 volte maggiore e segnale MS 1000 volte più elevato
- Amminazione riduttiva convenzionale con 2-AB; segnale di fluorescenza 4 volte maggiore e segnale MS 160 volte più elevato
Maggiore robustezza per risultati continui
Il kit GlycoWorks RapiFluor-MS per gli N-glicani consente agli analisti di eseguire una preparazione dei campioni ad alto rendimento con recupero quantitativo che garantisce una profilazione accurata e ripetibile degli N-glicani altamente paragonabile alle metodologie HPLC basate su 2-AB.
Fate clic qui per vedere una dimostrazione della robustezza della preparazione dei campioni con Rapifluoro-MS per gli N-glicani utilizzata insieme alla cromatografia su colonna Glycan BEH Amide HILIC.
Migliori recuperi per le molecole complesse ricche di disolfuro
Gli N-glicani vengono monitorati di routine per la qualità dei farmaci bioterapeutici perché incidono sulla sicurezza e sull’efficacia di molte proteine terapeutiche. L’analisi dei glicani attuale viene sviluppata con i glicani noti da anticorpi monoclonali (mAb). Esiste un metodo complementare che fornisce un profilo riproducibile degli N-glicani rilasciati dalla gonadotropina corionica umana (hCG), una glicoproteina altamente complessa con più legami disolfuro.
Fate clic qui per vedere come è possibile aggiungere DTT, un reagente riducente, per la completa denaturazione delle proteine, senza estendere la lunghezza del protocollo.
Aumento della produttività per l’analisi degli N-glicani
RapiFluor-MS riduce drasticamente i tempi complessivi di preparazione dei campioni e migliora notevolmente la risposta MS se abbinato al sistema ACQUITY UPLC H-Class Bio, mentre il rivelatore ACQUITY QDa fornisce un approccio per monitorare accuratamente le specie di N-glicani rilasciati.
Fate clic qui per vedere come monitorare rapidamente i profili di rilascio degli N-glicani durante lo sviluppo del processo utilizzando GlycoWorks RapiFluor-MS.
Recupero migliorato con il tampone SPE per fosfoglicani
Durante la purificazione con estrazione in fase solida (SPE), la perdita di glicani acidi marcati (in particolare di specie di glicani fosforilati) rappresenta una sfida per il monitoraggio accurato della glicosilazione bioterapica. Il tampone di eluizione SPE per fosfoglicani GlycoWorks, ottimizzato con additivo citrato, facilita l’eluizione e il recupero dei glicani fosforilati per ottenere la massima resa.
Offerte per l’amminazione riduttiva (2-AB)
La linea dei materiali di consumo per la preparazione dei campioni GlycoWorks e la colonna ACQUITY UPLC BEH per glicani sono ottimizzate per l’uso con i sistemi ACQUITY UPLC con rivelazione di fluorescenza (FLR) per separare i glicani rilasciati dai biofarmaci come derivati della 2-amminobenzammide (2-AB).
La linea dei materiali di consumo per la preparazione dei campioni GlycoWorks è specifica per gli N-glicani marcati 2-AB. Questa linea di materiali di consumo è particolarmente indicata per il mercato dei biofarmaci, tra cui l’immunoglobulina G (IgG). La linea di materiali di consumo per la preparazione dei campioni GlycoWorks non si limita all’IgG, ma è stata validata con l’IgG.
Fornite risultati ottimali con flessibilità e automazione
Waters offre una serie di soluzioni per l’automazione del workflow, tra cui Andrew+ Pipetting Robot e il software OneLab. Inoltre, gli script di avvio verificati per il metodo GlycoWorks RapiFluor-MS sono disponibili sulle piattaforme Tecan e Hamilton.
