Colonnes en phase inverse pour peptides

Chromatographie en phase inverse

La chromatographie en phase inverse utilisant des réactifs d’appariement d’ions tels que le TFA et l’acide formique sépare de manière très résolutive les mélanges peptidiques complexes (par exemple, les digestions tryptiques de protéines ou les longues séquences de peptides synthétiques) dont les séquences peuvent différer d’un seul acide aminé. L’hydrophobicité du peptide détermine l’ordre d’élution, les peptides les moins hydrophobes éluant en premier.

Des facteurs tels que la composition des particules (silice ou hybrides), la taille des pores (130 Å ou 300 Å), et la densité du ligand, ainsi que les conditions de séparation (par exemple, durée du gradient, température de la colonne, débit) jouent tous un rôle important dans l’obtention de la séparation attendue.

Comme pour les autres séparations, lorsque l’on utilise des particules de plus petite taille pour les modes UHPLC et UPLC, les colonnes offrent une meilleure résolution chromatographique et une vitesse d’analyse plus grande qu’en HPLC.

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Colonnes ACQUITY Premier Peptide

Les colonnes ACQUITY Premier de Waters sont le fruit des dernières avancées technologiques et offrent le plus haut niveau de performance, de flexibilité et de fiabilité chromatographiques afin d’optimiser les capacités des laboratoires dans le monde.

Bénéficiez des performances chromatographiques nécessaires grâce à nos technologies de particules fiables
Les colonnes ACQUITY Premier améliorent de façon significative la reproductibilité, la finesse de pics et le rendement en limitant les interactions entre les analytes et la surface de la colonne grâce à la technologie MaxPeak HPS (High Performance Surfaces)
Les procédures de passivation longues ou l’utilisation d’additifs complexes, généralement requises pour obtenir des performances optimales avec les colonnes classiques en acier inoxydable, ne sont plus nécessaires

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Colonnes ACQUITY UPLC Peptide

Les colonnes ACQUITY UPLC Peptide BEH C18 de 130 Å ou 300 Å offrent une large gamme de pH de travail et une stabilité exceptionnelle à la température ; elles permettent d’effectuer des applications allant de la protéomique aux cartes peptidiques. Les colonnes ACQUITY UPLC CSH C18 de 130 Å pour l’analyse des peptides présentent une surface de faible charge positive et peuvent être utilisées avec des éluants standard contenant du TFA ou avec un agent modificateur acide plus faible comme l’acide formique, ce qui évite de faire un compromis entre un éluant qui procure une finesse de pics et un éluant qui apporte une meilleure compatibilité MS.

La colonne HSS T3 Peptide, composée exclusivement de particules de silice, est la solution idéale pour la séparation de petits peptides polaires, car la rétention est supérieure à celle obtenue avec les colonnes hybrides BEH ou CSH de Waters. Les colonnes XSelect Peptide HSS T3 sont également disponibles pour les applications en mode UHPLC et HPLC, respectivement en 2,5 µm XP et 5 µm.

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Quatre chimies de colonnes dédiées aux peptides pour couvrir diverses applications

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Colonnes XBridge BEH pour peptides

Les colonnes XBridge Peptide BEH C18 offrent une large gamme de pH de travail et une stabilité exceptionnelle à la température ; elles permettent d’effectuer des applications allant de la protéomique aux cartes peptidiques. Ces colonnes HPLC conviennent parfaitement à l’analyse par chromatographie en phase inverse d’une large gamme de peptides, qu’ils soient acides ou basiques, hydrophiles ou hydrophobes, de petite ou de grande taille. Ces colonnes sont disponibles en porosité de 130 Å et 300 Å afin d’offrir différentes options de séparation pour les échantillons complexes.

Colonnes XSelect Peptide CSH

Les colonnes pour l’analyse de peptides à base de particules hybrides à surface chargée (CSH) offrent une capacité exceptionnelle de charge tout en conservant des capacités de pic élevées en présence d’éluants contenant 0,1 % d’acide formique ou 0,1 % de TFA. Ces colonnes conviennent particulièrement aux composés de moins de 10 000 Daltons et offrent une sélectivité différente de celle des particules BEH C18 de 130 Å. Les granulométries de 1,7 μm, 3,5 μm, 2,5 μm XP et 5 μm répondent aux besoins propres à chaque application analytique ou préparative. Soumises à des tests de contrôle qualité à l’aide de digestions tryptiques du cytochrome c avec un éluant contenant 0,1 % d’acide formique pour garantir la constance inter colonnes des résultats dans le cadre de méthodes validées.

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Séparation de peptides par nano- et micro- LC/MS

La micro LC/MS pour l’identification des peptides s’est considérablement simplifiée avec le dispositif de séparation iKey de 150 µm prêt à l’emploi et aux connexions fluidiques sans raccord. La sensibilité obtenue avec iKey est jusqu’à 40 fois supérieure à celle de l’UPLC sur une colonne de diamètre interne de 2,1 mm.

Colonnes BioSuite

Colonne BioSuite C18 de 100 Å, 3 μm PA-A

Spécialement conçue pour une rétention optimale des peptides polaires
Excellentes performances dans les séparations HPLC traditionnelles utilisant de faibles concentrations de TFA (par exemple, 0,025 % de TFA)

Colonne BioSuite C18 de 300 Å, 3,5 μm PA-B

Performances exceptionnelles lors de la séparation des digestions contenant des peptides hydrophiles, hydrophobes et basiques
Capacité et finesse de pic supérieures pour les séparations de peptides en présence de TFA (par exemple 0,1 % de TFA)
Solution adaptée pour la séparation de grands fragments de peptides (par exemple, les digestions par Lys-C)

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Colonnes BioSuite en phase inverse pour peptides

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Colonnes Symmetry

Les particules Symmetry, de phase inverse et à base de silice sont synthétisées à l’aide de réactifs organiques ultra-purs, ce qui donne une phase de grande pureté avec une très faible activité silanolique. Combinées à un taux de greffage élevé, elles permettent d’obtenir des séparations et des rendements exceptionnels.

Meilleur contrôle de la fabrication pour des résultats inter lots et inter colonnes constants
Pores de 100 Å et de 300 Å pour l’analyse de peptides de petite ou grande taille
La colonne SymmetryShield offre une sélectivité complémentaire à celle de la colonne Symmetry
Les colonnes SymmetryPrep permettent une transposition directe à l’échelle préparative tout en maintenant la résolution

Colonnes Delta-Pak HPLC

Les colonnes Delta-Pak HPLC sont composées de particules sphériques de silice, de 5 µm ou 15 µm, très stables et greffées (avec greffage terminal). Ces colonnes sont proposées en deux tailles de pores différentes (100 Å ou 300 Å), avec des ligands C4 ou C18 pour répondre à différents besoins de sélectivité et de rétention. En granulométrie de 15 µm, elles sont disponibles en différentes configurations, colonnes et cartouches, pour permettre des transpositions directes et prévisibles lors de purifications allant du milligramme au gramme. La même chimie est également disponible en particules de 5 µm pour des séparations plus résolutives, ce qui permet de vérifier facilement la pureté des fractions recueillies lors de purifications.