Columnas SEC

Columnas SEC

Separaciones por exclusión de tamaño de péptidos, proteínas, ácidos nucleicos, LNP y vectores virales

Separaciones por exclusión de tamaño de péptidos, proteínas, ácidos nucleicos, LNP y vectores virales

Obtenga una reproducibilidad entre lotes sin igual con la amplia gama de columnas y patrones de Cromatografía de exclusión por tamaño (SEC) de Waters para la caracterización de proteínas y péptidos.

SEC es una técnica eficaz para el análisis de fragmentos y agregados en la investigación, el desarrollo y la fabricación de proteínas bioterapéuticas, como la insulina o los anticuerpos monoclonales (mAb).Con SEC, también conocida como filtración en gel, se pueden separar las proteínas en función de su tamaño (radios hidrodinámicos frente a peso molecular absoluto) en solución, donde las especies de mayor tamaño eluyen antes que las proteínas más pequeñas. 

El tamaño de poro y el volumen de las partículas de SEC utilizadas en el relleno de la columna son las características determinantes de esta técnica de base isocrática, por lo que es importante elegir la columna adecuada. A medida que aumenta el peso molecular de las proteínas de interés, se seleccionan columnas SEC que comparativamente contengan partículas con un tamaño de poro mayor.

ACQUITY and XBridge Premier Protein SEC 250A Columns combine MaxPeak Premier and BEH-PEO Technologies for reliable SEC data. Columnas SEC
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Columnas MaxPeak Premier SEC para el análisis de proteínas

Mejore los resultados de SEC en cualquier sistema de LC con un mínimo desarrollo de métodos.

Mejore los resultados de SEC en cualquier sistema de LC con un mínimo desarrollo de métodos.
Anticuerpo monoclonal

Especificaciones

Descripción general

  • Este método “basado en plataforma” aumenta la eficacia para proteínas que van de 10 000 a 650 000 daltons al aprovechar la tecnología MaxPeak Premier combinada con la tecnología de partículas BEH-PEO.
  • Las interacciones secundarias no deseadas se minimizan para mejorar la reproducibilidad y los resultados de la separación con las partículas SEC híbridas con puentes de etileno (BEH).
  • Se garantiza un rendimiento fiable entre columnas y entre lotes con el control de calidad de las columnas probado con muestras de péptidos, proteínas y mAb relevantes.
  • Se obtienen análisis fiables de alto rendimiento en sistemas UPLC con nuestra oferta de tamaño de partícula de 1,7 µm y separaciones reproducibles en cualquier sistema HPLC, UHPLC o UPLC para satisfacer las diferentes necesidades de las aplicaciones que utilizan columnas de 2,5 µm. 
  • Se prolonga la vida útil de la columna analítica y se reduce el coste por análisis con las precolumnas para SEC. 
  • Se puede confirmar el rendimiento in situ de la columna SEC y del sistema de LC con los patrones BEH125, BEH200, BEH450 y de variantes de tamaño de mAb disponibles.
  • Fabricadas en una planta con certificación cGMP, ISO 9001, utilizando estrictos protocolos de fabricación y reactivos ultrapuros.

Uso recomendado: Para análisis de péptidos, proteínas y vectores virales por exclusión de tamaño.

Especificaciones de dispersión del sistema para las recomendaciones de columnas

Especificaciones de dispersión del sistema para las recomendaciones de columnas
Dispersiones del sistema LC <20 µL (UPLC)
  • Precolumnas y columnas ACQUITY Premier Protein SEC de 250 Å
  • Precolumnas y columnas ACQUITY UPLC Protein BEH SEC de 125 Å, 200 Å y 450 Å

Precolumnas y columnas de 1,7 µm para sistemas UPLC de baja dispersión

Dispersiones del sistema de LC >20 µL - ≤35 µL (UHPLC)
  • Precolumnas y columnas XBridge Premier Protein SEC de 250 Å
  • Precolumnas y columnas XBridge Protein BEH SEC de 125 Å, 200 Å y 450 Å
  • Precolumnas y columnas BioResolve mAb SEC

Precolumnas y columnas de 2,5 µm para sistemas UHPLC

Dispersiones del sistema LC >35 µL (HPLC)
  • Precolumnas y columnas XBridge Protein BEH SEC de 125 Å, 200 Å y 450 Å
  • Precolumnas y columnas XBridge Premier Protein SEC de 250 Å
  • Precolumnas y columnas BioResolve mAb SEC
  • Precolumnas y columnas BioSuite SEC

Precolumnas y columnas de 3,5 µm para sistemas HPLC

Columnas GTxResolve SEC

Columnas GTxResolve SEC
Columnas GTxResolve Premier BEH SEC de 450 Å
  • Columnas con un tamaño de partícula de 2,5 µm para separaciones por UHPLC y UPLC
  • Interacciones secundarias más bajas y ruido más bajo, adecuado para métodos de plataforma
  • Hardware de baja adsorción necesario para el análisis de muestras de productos biológicos
  • Tamaño de poro de 450 Å con un poder de resolución hasta un 50 % mayor, lo que reduce la necesidad de consumo de muestra y permite realizar análisis más rápidos.

Explore las columnas GTxResolve SEC

Columnas GTxResolve Premier SEC de 1000 Å
  • Columnas de 3 µm para separaciones por UHPLC y UPLC
  • Columnas de 1000 Å de alta eficacia para el análisis de agregados de fármacos GTx con un diámetro de 80-200 nm
  • Baja interacción secundaria y compatibilidad mejorada con un detector de aplicación universal, como MALS
  • Hardware de baja adsorción necesario para el análisis de muestras de productos biológicos

Explore las columnas GTxResolve SEC

Columnas SEC para proteínas

Columnas SEC para proteínas
Precolumnas y columnas ACQUITY Premier Protein SEC de 250 Å
  • Columnas de partículas de menos de 2 μm para separaciones UPLC.
  • Tamaño de poro de 250 Å
  • Separaciones SEC de alto rendimiento y resolución de biomoléculas que van de 10 000 a 650 000 daltons en sistemas UPLC de baja dispersión.
  • Columnas de precolumnas SEC disponibles para prolongar la vida útil de las columnas SEC analíticas
  • Permite reducir significativamente la interacción secundaria iónica e hidrofóbica no deseada para los métodos de plataforma SEC deseados con la tecnología MaxPeak Premier y la tecnología de partículas BEH-PEO SEC

Explorar las columnas y precolumnas ACQUITY Premier Protein BEH SEC

Precolumnas y columnas XBridge Premier Protein SEC de 250 Å
  • Columnas de partículas de 2,5 µm para separaciones por HPLC y UHPLC
  • Tamaño de poro de 250 Å
  • Separaciones SEC de alta resolución de biomoléculas que van de 10 000 a 650 000 daltons en cualquier sistema de LC
  • Columnas de precolumnas SEC disponibles para prolongar la vida útil de las columnas SEC analíticas
  • Permite reducir significativamente la interacción secundaria iónica e hidrofóbica no deseada para los métodos de plataforma SEC deseados con la tecnología MaxPeak Premier y la tecnología de partículas BEH-PEO SEC
  • Diseñadas específicamente y sometidas a pruebas de control de calidad (QC) con el patrón de variantes de tamaño de mAb certificado por NIST para garantizar la consistencia entre lotes

Explorar las columnas XBridge Premier Protein BEH SEC

Precolumnas y columnas BioResolve mAb SEC
  • Columnas de partículas de 2,5 μm para separaciones UPLC, UHPLC y HPLC
  • Tamaño de poro de 200 Å
  • Obtener una cuantificación exacta y reproducible de anticuerpos monoclonales (mAb), agregados de alto peso molecular asociados (>300 000 Da) y fragmentos de menor peso molecular (p. ej., <100 000 Da).
  • Cada columna rellena se prueba con un patrón de variantes de tamaño de mAb con certificado NIST para ayudar a garantizar la uniformidad del rendimiento entre lotes y entre columnas

Explorar las columnas y precolumnas BioResolve mAb SEC

Columnas y precolumnas ACQUITY UPLC Protein BEH SEC
  • Columnas de partículas de menos de 2 μm para separaciones por UPLC (2,5 μm para 450 Å)
  • Las opciones de tamaño de poro son: 125 Å, 200 Å y 450 Å
  • Columnas de precolumnas SEC disponibles para prolongar la vida útil de las columnas SEC analíticas
  • Diseñado específicamente y sometido a pruebas de control de calidad con patrones de proteínas BEH125, BEH200 o BEH450 para garantizar la coherencia entre lotes
  • Separaciones 10 veces más rápidas que con el sistema SEC basado en HPLC tradicional

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Columnas XBridge Protein BEH SEC
  • Columnas de partículas de 2,5 μm para su uso en cualquier sistema UPLC, UHPLC o HPLC.
  • Las opciones de tamaño de poro son: 125 Å, 200 Å y 450 Å
  • Columnas de precolumnas SEC disponibles para prolongar la vida útil de las columnas SEC analíticas
  • Diseñado específicamente y sometido a pruebas de control de calidad con patrones de proteínas BEH125, BEH200 o BEH450 para garantizar la coherencia entre lotes

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Columnas SEC para péptidos

Columnas SEC para péptidos
Columnas BioSuite SEC
  • Columnas SEC de diol basadas en sílice
  • Los límites de exclusión del peso molecular están determinados principalmente por el tamaño de poro seleccionado
  • Disponibles en dimensiones de columna analíticas y semipreparativas

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Columnas Protein-Pak SEC
  • Basadas en un partículas de sílice ligada a diol de 10 μm
  • Son capaces de resolver proteínas que difieren en el doble del peso molecular
  • Pueden distinguir proteínas que difieren en tan solo un 15 % en peso molecular

Explorar las columnas Protein-Pak SEC

Se debe elegir la columna SEC adecuada para el laboratorio

SEC es ideal para el análisis de agregados y fragmentos en la investigación, el desarrollo y la fabricación de péptidos bioterapéuticos, proteínas y vectores virales, pero es importante elegir la columna adecuada para el análisis. Utilizar los siguientes criterios para elegir una columna que proporcione análisis SEC fiables y de alta calidad de diversas biomoléculas, incluida la insulina, los anticuerpos monoclonales y los virus adenoasociados (AAV).

  Al elegir una columna SEC, debe tenerse en cuenta lo siguiente:

  • ¿Cuál es el peso molecular de la muestra?

  • ¿Cuál es la dispersión del sistema LC?

  • ¿Se están separando los componentes con una diferencia inferior a 2 veces el peso molecular (MW)?

  • ¿Se están separando los componentes con una diferencia mayor a 2 veces el peso molecular? 

Abordar la complejidad de las separaciones SEC

Experimente los avances en las tecnologías basadas en SEC para minimizar las interacciones iónicas e hidrofóbicas específicas no deseadas y obtener resultados más fiables con las columnas y precolumnas ACQUITY Premier Protein SEC y XBridge Premier Protein SEC.

Las columnas MaxPeak Premier SEC permiten:

  • Resolver de forma reproducible los componentes de la muestra inyectada con una diferencia inferior al doble de tamaño para las aplicaciones más exigentes.

  • Utilizar un “método SEC de plataforma” para reducir el tiempo y el coste del desarrollo del método.

  • Garantizar el rendimiento de un lote a otro y de una columna a otra.

Recursos

Documentos

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Asistencia

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Siguientes pasos

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Las columnas de SEC (Cromatografía de Exclusión por Tamaño) son un tipo de herramienta utilizada en laboratorios para clasificar y estudiar moléculas según su tamaño. Son como filtros que separan las moléculas según su tamaño. Así es como funcionan:

Cómo Clasifican las Moléculas: La SEC clasifica las moléculas por tamaño, no por sus propiedades químicas. Las moléculas más grandes se mueven más rápido a través de la columna porque no pueden entrar en los pequeños poros del material de la columna, mientras que las moléculas más pequeñas sí pueden y tardan más en moverse.

Material de la Columna: El material de la columna está compuesto por pequeñas partículas con agujeros, a menudo hechas de sustancias como agarosa o dextrano. Estos agujeros tienen diferentes tamaños, lo que determina qué tamaño de moléculas puede pasar y cuáles se quedan atrapadas.

Moviendo las Cosas: Un líquido llamado fase móvil ayuda a transportar las moléculas a través de la columna. A diferencia de otros métodos donde este líquido cambia, en la SEC, permanece igual durante todo el proceso.

Inyección de la Muestra: La muestra, que contiene una mezcla de moléculas de diferentes tamaños, se inyecta en la columna. A medida que se mueve, las moléculas más grandes no pueden entrar en los agujeros y se mueven rápidamente, mientras que las más pequeñas sí pueden y tardan más en salir.

Detección de Moléculas: Los científicos utilizan diferentes métodos para detectar las moléculas a medida que salen de la columna, como iluminar con luz o medir cómo dispersan la luz. Esto les ayuda a determinar qué hay en la muestra y en qué cantidad.

Para Qué se Usan: Las columnas de SEC se utilizan en muchos campos como la biología, la medicina y la química para estudiar cosas como proteínas, ADN y otras moléculas grandes. Ayudan a los científicos a determinar el tamaño y la pureza de estas sustancias, lo cual es muy importante para entender cómo funcionan.

Las columnas de SEC son una herramienta crucial para los científicos porque les permiten separar moléculas por tamaño, proporcionando información importante sobre sustancias complejas.

Preguntas Frecuentes sobre Columnas de SEC

1.¿Qué tipos de Columnas de SEC ofrece Waters?
Waters ofrece una amplia gama de columnas de SEC (Cromatografía de Exclusión por Tamaño) diseñadas para satisfacer diversas necesidades analíticas. Estas incluyen columnas específicamente adaptadas para la separación y el análisis de proteínas, péptidos, ácidos nucleicos y polímeros.
Para el análisis de proteínas, Waters proporciona columnas como las columnas ACQUITY UPLC BEH SEC, que ofrecen alta resolución y excelente reproducibilidad. Para el análisis de polímeros, las columnas Styragel son una opción popular debido a su robustez y amplio rango de peso molecular. Cada tipo de columna está optimizado para rangos específicos de peso molecular y requisitos de separación, asegurando que puedas encontrar la columna adecuada para una aplicación particular.

2.¿Cómo debo preparar mis muestras para usar con las Columnas de SEC de Waters?
Para una preparación adecuada de la muestra, comienza filtrando tu muestra a través de un filtro de 0.22 o 0.45 micrones para eliminar partículas que podrían obstruir la columna. Asegúrate de que tu muestra esté disuelta en un tampón o solvente compatible que coincida con la fase móvil para evitar precipitación o agregación.
Si trabajas con proteínas, es importante mantener el pH y la fuerza iónica adecuados para evitar la desnaturalización. Concentra tu muestra a un volumen apropiado y evita sobrecargar la columna, ya que esto puede llevar a una mala resolución y ensanchamiento de picos.

3.¿Cómo mantengo y almaceno las Columnas de SEC de Waters para asegurar su uso a largo plazo?
Para asegurar el uso a largo plazo de las Columnas de SEC de Waters, el mantenimiento y almacenamiento adecuados son esenciales para mantener tu garantía. Después de cada uso, enjuaga bien la columna con un solvente o tampón compatible para eliminar cualquier residuo de muestra y prevenir la contaminación. Almacena la columna en un solvente adecuado, típicamente la fase móvil utilizada en tu separación, para mantener el material de empaque hidratado y estable.
Evita almacenar la columna en temperaturas extremas y asegúrate de que esté bien sellada para prevenir la evaporación o el secado. Monitorea regularmente el rendimiento de la columna verificando parámetros como presión y resolución y aborda cualquier problema de inmediato para prolongar la vida útil de la columna.