SEC-Säulen

SEC-Säulen

Größenbasierte Trennungen von Peptiden, Proteinen, Nukleinsäuren, LNPs und viralen Vektoren

Größenbasierte Trennungen von Peptiden, Proteinen, Nukleinsäuren, LNPs und viralen Vektoren

Erzielen Sie unerreichte Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge mit dem breiten Spektrum an Waters Säulen und Standards für Größenausschlusschromatographie (SEC) für die Charakterisierung von Proteinen und Peptiden.

Größenausschlusschromatographie (SEC) ist eine leistungsfähige Technik für die Analyse von Aggregaten und Fragmenten in Forschung und Entwicklung sowie die Herstellung von biotherapeutischen Proteinen wie Insulin und monoklonalen Antikörpern (mAb).Bei der auch als Gelfiltration bekannten SEC können Sie Proteine basierend auf ihrer Größe (hydrodynamische Radien statt absolutes Molekulargewicht) in Lösung trennen, wobei größere Spezies vor kleineren Proteinen eluieren. 

Die Porenweite und das Volumen der SEC-Partikel, die in der gepackten Säule verwendet werden, treiben diese isokratisch basierte Technik an, sodass die von Ihnen ausgewählte Säule eine Rolle spielt.Mit steigendem Molekulargewicht der interessierenden Proteine werden SEC-Säulen mit vergleichsweise größeren Partikeln ausgewählt.

ACQUITY and XBridge Premier Protein SEC 250A Columns combine MaxPeak Premier and BEH-PEO Technologies for reliable SEC data. SEC-Säulen
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MaxPeak Premier SEC-Säulen für die Proteinanalyse

Verbessern Sie die SEC-Ergebnisse auf jedem LC-System mit minimaler Methodenentwicklung.

Verbessern Sie die SEC-Ergebnisse auf jedem LC-System mit minimaler Methodenentwicklung.
Monoklonaler Antikörper

Technische Daten

Überblick

  • Steigern Sie die Effizienz mit dieser „plattformbasierten“ Methode für Proteine im Bereich von 10.000 bis 650.000 Dalton mithilfe der MaxPeak Premier Technologie in Verbindung mit der BEH-PEO Partikeltechnologie
  • Minimieren Sie unerwünschte sekundäre Wechselwirkungen, um die Reproduzierbarkeit der Trennergebnisse und die Ergebnisse mit Ethylene Bridged Hybrid (BEH) SEC-Partikeln zu verbessern
  • Stellen Sie eine zuverlässige Leistung von Säule zu Säule und von Charge zu Charge sicher, indem Sie die Säulenqualitätskontrolle mit relevanten Peptid-, Protein- und mAb-Proben testen
  • Erzielen Sie zuverlässige Analysen mit hohem Durchsatz auf UPLC-Systemen mit unserer Partikelgröße von 1,7 µm und reproduzierbaren Trennungen auf jedem HPLC-, UHPLC- oder UPLC-System, um unterschiedliche Applikationsanforderungen mit 2,5 µm zu erfüllen
  • Verlängern Sie die Lebensdauer der analytischen Trennsäule und senken Sie die Kosten pro Analyse mit SEC-Vorsäulen
  • Bestätigen Sie die Leistung der SEC-Säule und des LC-Systems vor Ort mit den verfügbaren Größenvarianten-Standards BEH125, BEH200, BEH450 und mAb
  • Hergestellt in einem nach ISO 9001 zertifizierten cGMP-Werk mit strengen Fertigungsprotokollen und ultrareinen Reagenzien

Empfohlene Verwendung: Für größenbasierte Analysen von Peptiden, Proteinen und viralen Vektoren.

Vorgaben zur Systemdispersion für Säulenempfehlungen

Vorgaben zur Systemdispersion für Säulenempfehlungen
LC-Systemdispersionen < 20 µL (UPLC)
  • ACQUITY Premier Protein SEC 250 Å Vorsäulen und Säulen
  • ACQUITY UPLC Protein BEH SEC-Vorsäulen und -Säulen mit 125 Å, 200 Å und 450 Å

1,7 µm Vorsäulen und Säulen für UPLC-Systeme mit niedriger Dispersion

LC-Systemdispersionen > 20 µL – ≤ 35 µL (UHPLC)
  • XBridge Premier Protein SEC Vorsäulen und Säulen mit 250 Å
  • XBridge Protein BEH SEC-Vorsäulen und -Säulen mit 125 Å, 200 Å und 450 Å
  • BioResolve mAb SEC-Vorsäulen und -Säulen

2,5-µm-Vorsäulen und -Säulen für UHPLC-Systeme

LC-Systemdispersionen > 35 µL (HPLC)
  • XBridge Protein BEH SEC-Vorsäulen und -Säulen mit 125 Å, 200 Å und 450 Å
  • XBridge Premier Protein SEC Vorsäulen und Säulen mit 250 Å
  • BioResolve mAb SEC-Vorsäulen und -Säulen
  • BioSuite SEC-Vorsäulen und -Säulen

3,5-µm-Vorsäulen und -Säulen für HPLC-Systeme

GTxResolve SEC-Säulen

GTxResolve SEC-Säulen
GTxResolve Premier BEH SEC 450 Å-Säulen
  • 2,5 µm Partikelgröße Säulen für UHPLC- und UPLC-Trennungen
  • Niedrigere sekundäre Wechselwirkungen und geringeres Rauschen sind für Plattformmethoden geeignet
  • Hardware mit geringer Adsorption, die für die Analyse von biologischen Proben erforderlich ist
  • 450 Å Porengröße mit bis zu 50 % höherer Auflösungsleistung, die den Bedarf an Probenverbrauch reduziert und schnellere Analysen ermöglicht

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GTxResolve Premier SEC 1000 Å-Säulen
  • 3-µm-Säulen für UHPLC- und UPLC-Trennungen
  • 1000-Å-Säulen mit hoher Effizienz für die Aggregatanalyse von GTx-Arzneimittel mit einem Durchmesser von 80 bis 200 nm
  • Geringe sekundäre Wechselwirkung und verbesserte Kompatibilität mit universell einsetzbaren Detektor, z. B. MALS
  • Hardware mit geringer Adsorption, die für die Analyse von biologischen Proben erforderlich ist

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Protein SEC-Säulen

Protein SEC-Säulen
ACQUITY Premier Protein SEC 250 Å Vorsäulen und Säulen
  • Sub-2-μm-Partikelsäulen für UPLC-Trennungen
  • Porenweite 250 Å
  • SEC-Trennungen mit hohem Durchsatz und hoher Auflösung von Biomolekülen im Bereich von 10.000 bis 650.000 Dalton auf UPLC-Systemen mit niedriger Dispersion
  • SEC-Vorsäulen zur Verlängerung der analytischen Lebensdauer der SEC-Säule verfügbar
  • Mit der MaxPeak Premier Technologie und der BEH-PEO SEC-Partikeltechnologie werden unerwünschte ionische und hydrophobe Sekundärinteraktionen für die gewünschten SEC-Plattformmethoden erheblich reduziert

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XBridge Premier Protein SEC Vorsäulen und Säulen mit 250 Å
  • 2,5-µm-Partikelsäulen für HPLC- und UHPLC-Trennungen
  • Porenweite 250 Å
  • Hochauflösende SEC-Trennungen von Biomolekülen im Bereich von 10.000 bis 650.000 Dalton mit jedem LC-System
  • SEC-Vorsäulen zur Verlängerung der analytischen Lebensdauer der SEC-Säule verfügbar
  • Mit der MaxPeak Premier Technologie und der BEH-PEO SEC-Partikeltechnologie werden unerwünschte ionische und hydrophobe Sekundärinteraktionen für die gewünschten SEC-Plattformmethoden erheblich reduziert
  • Speziell entwickelt und QC-getestet mit NIST-basiertem mAb-Größenvarianten-Standard, um die Konsistenz von Batch zu Batch sicherzustellen

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BioResolve mAb SEC-Vorsäulen und -Säulen
  • 2,5-μm-Partikelsäulen für UPLC-, UHPLC- und HPLC-Trennungen
  • Porenweite 200 Å
  • Erzielen Sie eine reproduzierbare, genaue Quantifizierung von monoklonalen Antikörpern (mAbs), assoziierten Aggregaten mit hohem Molekulargewicht (> 300.000 Da) und Fragmenten mit niedrigerem Molekulargewicht (z. B. < 100.000 Da)
  • Jede gepackte Säule wird mit einem NIST-basierten mAb-Größenvarianten-Standard getestet, um eine konsistente Leistung von Charge zu Charge und von Säule zu Säule sicherzustellen

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ACQUITY UPLC Protein BEH SEC-Vorsäulen und -Säulen
  • Sub-2-μm-Partikelsäulen für UPLC-Trennungen (2,5 μm für 450 Å)
  • Porenweitenoptionen: 125 Å, 200 Å und 450 Å
  • SEC-Vorsäulen zur Verlängerung der analytischen Lebensdauer der SEC-Säule verfügbar
  • Speziell entwickelt und QC-getestet mit den Proteinstandards BEH125, BEH200 oder BEH450, um die Konsistenz von Charge zu Charge sicherzustellen
  • 10 mal schneller als herkömmliche HPLC-basierte SEC

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XBridge Protein BEH SEC-Säulen
  • 2,5-μm-Partikelsäulen zur Verwendung mit jedem UPLC-, UHPLC- oder HPLC-System
  • Porenweitenoptionen: 125 Å, 200 Å und 450 Å
  • SEC-Vorsäulen zur Verlängerung der analytischen Lebensdauer der SEC-Säule verfügbar
  • Speziell entwickelt und QC-getestet mit den Proteinstandards BEH125, BEH200 oder BEH450, um die Konsistenz von Charge zu Charge sicherzustellen

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Peptid SEC-Säulen

Peptid SEC-Säulen
BioSuite SEC-Säulen
  • Diol-SEC-Säulen auf Silikabasis
  • Die Ausschlussgrenzwerte für das Molekulargewicht werden in erster Linie durch die ausgewählte Porenweite bestimmt
  • In analytischen und semipräparativen Säulengrößen verfügbar

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Protein-Pak SEC-Säulen
  • Basierend auf einem 10 μm diolgebundenen Silika
  • trennen Proteine, die sich im Molekulargewicht um den Faktor 2 unterscheiden
  • unterscheiden Proteine, die im Molekulargewicht nur 15 % voneinander abweichen

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Wählen Sie die richtige SEC-Säule für Ihr Labor

SEC ist ideal für die Analyse von Aggregaten und Fragmenten in der Forschung, Entwicklung und Herstellung von biotherapeutischen Peptiden, Proteinen und viralen Vektoren. Die Auswahl der richtigen Säule für Ihre Analyse ist jedoch wichtig. Verwenden Sie die folgenden Kriterien, um eine Säule auszuwählen, die zuverlässige, hochwertige SEC-Analysen verschiedener Biomoleküle liefert, einschließlich Insulin, monoklonale Antikörper und adeno-assoziierte Viren (AAV).

  Was ist bei der Auswahl einer SEC-Säule zu beachten:

  • Wie groß ist das Molekulargewicht Ihrer Probe?

  • Wie groß ist das Dispersionsvolumen Ihres LC-Systems?

  • Trennen Sie Komponenten, deren Molekulargewichte sich um weniger als das Zweifache unterscheiden?

  • Trennen Sie Komponenten, deren Molekulargewichte sich um mehr als das Zweifache unterscheiden?

Bewältigung der Komplexität von SEC-Trennungen

Erleben Sie die Fortschritte bei SEC-basierten Technologien, um unerwünschte spezifische ionische und hydrophobe Wechselwirkungen zu beheben, um zuverlässigere Ergebnisse mit ACQUITY Premier Protein SEC- und XBridge Premier Protein SEC-Säulen und -Vorsäulen zu erhalten.

Mit MaxPeak Premier SEC-Säulen können Sie:

  • Injizierte Probenbestandteile, die sich in ihrer Größe weniger als 2 mal unterscheiden, für anspruchsvolle Applikationen reproduzierbar auflösen

  • Eine „Plattform-SEC-Methode“ verwenden, um Zeit und Kosten für die Methodenentwicklung zu reduzieren

  • Die Leistung von Batch zu Batch und von Säule zu Säule sicherstellen

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BioSuite Säulen
Mit BioSuite HPLC Säulen können Proteine und Peptide isoliert, analysiert und charakterisiert werden. Die chemische Zusammensetzung umfasst C18, Anionenaustausch, Kationenaustausch, hochauflösende SEC, Phenyl, SEC und ultrahochauflösende SEC.

Protein-Pak Säulen
Mit Protein-Pak HPLC IEX, SEC, HIC-basierten Säulen profitieren Sie von hochwertigen Analysen und der Isolierung von Proteinen oder Polypeptiden im Labormaßstab. Zu den Chemikalien gehören starke und schwache Anionen- und Kationenaustauscher, HIC und SEC.

Proteinstandards
Verbessern und validieren Sie Proteinapplikationen bei UPLC-, UHPLC- oder HPLC-Geräten mit gebrauchsfertigen, speziell formulierten Proteinstandards in Waters Vials zur direkten Solubilisierung.

Protein-Säulen
Charakterisieren Sie komplexe Biomoleküle mit Waters Säulen für die Umkehrphasen-, Ionenaustausch-, hydrophile Interaktions- und Größenausschlusschromatographie für Peptidtrennungsapplikationen wie die Analyse und Aufreinigung synthetischer Peptide, die Charakterisierung komplexer proteolytischer Verdauungen und die Bioanalyse.

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SEC (Größenausschlusschromatographie) Säulen sind ein Werkzeug, das in Laboren verwendet wird, um Moleküle basierend auf ihrer Größe zu sortieren und zu untersuchen. Sie funktionieren ähnlich wie Filter, die Moleküle nach ihrer Größe trennen. So funktionieren sie:

Wie sie Moleküle sortieren: SEC sortiert Moleküle nach Größe, nicht nach ihren chemischen Eigenschaften. Größere Moleküle bewegen sich schneller durch die Säule, weil sie nicht in die kleinen Poren des Säulenmaterials passen, während kleinere Moleküle dies können und länger brauchen, um durchzukommen.

Säulenmaterial: Das Säulenmaterial besteht aus winzigen Partikeln mit Löchern, oft aus Materialien wie Agarose oder Dextran. Diese Löcher haben unterschiedliche Größen, die bestimmen, welche Größe von Molekülen hindurchgehen kann und welche stecken bleiben.

Transport der Moleküle: Eine Flüssigkeit, die als mobile Phase bezeichnet wird, hilft dabei, die Moleküle durch die Säule zu transportieren. Im Gegensatz zu einigen anderen Methoden, bei denen sich diese Flüssigkeit ändert, bleibt sie bei der SEC während des gesamten Prozesses gleich.

Probeninjektion: Die Probe, die eine Mischung von Molekülen unterschiedlicher Größe enthält, wird in die Säule injiziert. Während sie sich durch die Säule bewegt, können die größeren Moleküle nicht in die Löcher eindringen und bewegen sich schnell, während die kleineren Moleküle dies können und länger brauchen, um herauszukommen.

Erkennung der Moleküle: Wissenschaftler verwenden verschiedene Methoden, um die Moleküle zu erkennen, wenn sie aus der Säule kommen, wie z.B. das Bestrahlen mit Licht oder das Messen, wie sie Licht streuen. Dies hilft ihnen herauszufinden, was in der Probe enthalten ist und wie viel davon vorhanden ist.

Wofür sie verwendet werden: SEC-Säulen werden in vielen Bereichen wie Biologie, Medizin und Chemie verwendet, um Dinge wie Proteine, DNA und andere große Moleküle zu untersuchen. Sie helfen Wissenschaftlern, die Größe und Reinheit dieser Substanzen zu bestimmen, was sehr wichtig ist, um zu verstehen, wie sie funktionieren.

SEC-Säulen sind ein wichtiges Werkzeug für Wissenschaftler, da sie es ihnen ermöglichen, Moleküle nach Größe zu trennen und wichtige Informationen über komplexe Substanzen zu erhalten.

Häufig gestellte Fragen zu SEC-Säulen

1. Welche Arten von SEC-Säulen bietet Waters an?
Waters bietet eine vielfältige Auswahl an SEC (Größenausschlusschromatographie) Säulen, die auf verschiedene analytische Bedürfnisse zugeschnitten sind. Dazu gehören Säulen, die speziell für die Trennung und Analyse von Proteinen, Peptiden, Nukleinsäuren und Polymeren entwickelt wurden.
Für die Proteinanalyse bietet Waters Säulen wie die ACQUITY UPLC BEH SEC Säulen an, die eine hohe Auflösung und ausgezeichnete Reproduzierbarkeit bieten. Für die Polymeranalyse sind die Styragel-Säulen aufgrund ihrer Robustheit und ihres breiten Molekulargewichtsbereichs eine beliebte Wahl. Jeder Säulentyp ist für spezifische Molekulargewichtsbereiche und Trennanforderungen optimiert, sodass Sie die richtige Säule für eine bestimmte Anwendung finden können.

2. Wie sollte ich meine Proben für die Verwendung mit Waters SEC-Säulen vorbereiten?
Für eine ordnungsgemäße Probenvorbereitung filtern Sie Ihre Probe zunächst durch einen 0,22- oder 0,45-Mikron-Filter, um Partikel zu entfernen, die die Säule verstopfen könnten. Stellen Sie sicher, dass Ihre Probe in einem kompatiblen Puffer oder Lösungsmittel gelöst ist, das der mobilen Phase entspricht, um Ausfällungen oder Aggregationen zu vermeiden.
Wenn Sie mit Proteinen arbeiten, ist es wichtig, den geeigneten pH-Wert und die Ionenstärke aufrechtzuerhalten, um eine Denaturierung zu verhindern. Konzentrieren Sie Ihre Probe auf ein geeignetes Volumen und vermeiden Sie eine Überladung der Säule, da dies zu schlechter Auflösung und Peakverbreiterung führen kann.

3. Wie pflege und lagere ich Waters SEC-Säulen, um eine langfristige Nutzbarkeit zu gewährleisten?
Um die langfristige Nutzbarkeit von Waters SEC-Säulen zu gewährleisten, sind eine ordnungsgemäße Pflege und Lagerung unerlässlich, um Ihre Garantie zu erhalten. Spülen Sie die Säule nach jedem Gebrauch gründlich mit einem kompatiblen Lösungsmittel oder Puffer, um Rückstände zu entfernen und eine Kontamination zu verhindern. Lagern Sie die Säule in einem geeigneten Lösungsmittel, typischerweise der mobilen Phase, die in Ihrer Trennung verwendet wurde, um das Packungsmaterial hydratisiert und stabil zu halten.
Vermeiden Sie es, die Säule extremen Temperaturen auszusetzen, und stellen Sie sicher, dass sie fest verschlossen ist, um Verdunstung oder Austrocknung zu verhindern. Überwachen Sie regelmäßig die Säulenleistung, indem Sie Parameter wie Druck und Auflösung überprüfen, und beheben Sie Probleme umgehend, um die Lebensdauer der Säule zu verlängern.