Mapeamento de peptídeos

Obtenha percepções incomparáveis sobre a identificação, a estabilidade e as modificações de proteínas com as soluções de mapeamento de peptídeos da Waters. As soluções de sistema adequadas para a finalidade da Waters integram preparo de amostras, colunas, automação, equipamentos e software com a metodologia, facilidade de uso, documentação e suporte a aplicações, para melhor resolução de digestos complexos de proteínas e glicoproteínas com maior rendimento.

Obtenha percepções incomparáveis sobre a identificação, a estabilidade e as modificações de proteínas com as soluções de mapeamento de peptídeos da Waters. As soluções de sistema adequadas para a finalidade da Waters integram preparo de amostras, colunas, automação, equipamentos e software com a metodologia, facilidade de uso, documentação e suporte a aplicações, para melhor resolução de digestos complexos de proteínas e glicoproteínas com maior rendimento.

Visão geral

O mapeamento de peptídeos é fundamental para a caracterização e o monitoramento abrangentes de biofármacos. A obtenção de uma resolução cromatográfica adequada para separar de forma confiável cada fragmento de digestão requer métodos robustos e reprodutíveis com desempenho cromatográfico excepcional.

As soluções de mapeamento de peptídeos da Waters combinam automação, preparo de amostras, separação cromatográfica, espectrometria de massas e rotinas de trabalho de software abrangentes para fornecer uma análise sem comparação de digestos complexos de proteínas e glicoproteínas com alto rendimento. As soluções de análise quantitativa e qualitativa da Waters fornecem suporte a uma caracterização eficaz, transferência de métodos simples e monitoramento pronto para conformidade para laboratórios de rotina. Alcance seus objetivos de pesquisa e desenvolvimento com as rotinas de trabalho de mapeamento de peptídeos sólidas e robustas da Waters.

Aplicações

Caracterização do mapa de peptídeos
Monitoramento de vários atributos de peptídeos
Mapeamento de peptídeos com detecção óptica

A caracterização do mapa de peptídeos é essencial para elucidar a estrutura principal de aminoácidos e os atributos de qualidade das proteínas, incluindo anticorpos monoclonais (mAbs, Monoclonal Antibodies) e conjugados droga-anticorpo (ADCs, Antibody-Drug Conjugates).

Após a digestão das proteínas, cada peptídeo subsequente fornece informações de sequência, tempo de retenção e intensidade para confirmar toda a sequência das proteínas. A Waters fornece rotinas de trabalho poderosas de hardware e software de espectrometria de massas para entender as misturas de digestões complexas e desenvolver metodologias adequadas para transferência para laboratórios de rotina.

A caracterização do mapa de peptídeos é essencial para elucidar a estrutura principal de aminoácidos e os atributos de qualidade das proteínas, incluindo anticorpos monoclonais (mAbs, Monoclonal Antibodies) e conjugados droga-anticorpo (ADCs, Antibody-Drug Conjugates).

Após a digestão das proteínas, cada peptídeo subsequente fornece informações de sequência, tempo de retenção e intensidade para confirmar toda a sequência das proteínas. A Waters fornece rotinas de trabalho poderosas de hardware e software de espectrometria de massas para entender as misturas de digestões complexas e desenvolver metodologias adequadas para transferência para laboratórios de rotina.

Notas de aplicação

O monitoramento de atributos de peptídeos por LC-MS desempenha um papel crucial para garantir a qualidade e a segurança de bioterapêuticos, com as agências regulatórias exigindo confirmação da estrutura desejada de produtos para demonstrar entendimento dos processos durante o desenvolvimento e para fins de liberação de lotes.

Sua adoção está se expandindo para áreas como métodos de vários atributos (MAM, Multi-Attribute Methods), que permite monitorar vários atributos de qualidade de produto (PQAs, Product Quality Attributes) e atributos críticos de qualidade (CQAs, Critical Quality Attributes) em uma única análise. Ele também tem a capacidade de detectar impurezas desconhecidas e modificações, como oxidação, desamidação, modificação da succinimida, glicosilação, modificações nos terminais C e N e isomerização.

O monitoramento de atributos de peptídeos por LC-MS desempenha um papel crucial para garantir a qualidade e a segurança de bioterapêuticos, com as agências regulatórias exigindo confirmação da estrutura desejada de produtos para demonstrar entendimento dos processos durante o desenvolvimento e para fins de liberação de lotes.

Sua adoção está se expandindo para áreas como métodos de vários atributos (MAM, Multi-Attribute Methods), que permite monitorar vários atributos de qualidade de produto (PQAs, Product Quality Attributes) e atributos críticos de qualidade (CQAs, Critical Quality Attributes) em uma única análise. Ele também tem a capacidade de detectar impurezas desconhecidas e modificações, como oxidação, desamidação, modificação da succinimida, glicosilação, modificações nos terminais C e N e isomerização.

Notas de aplicação

A detecção óptica (como UV) é frequentemente utilizada para monitorar peptídeos. Essa abordagem é considerada o padrão ouro para testes de identidade e qualidade em ambientes de GQ/CQ. Os peptídeos podem ser monitorados com base no perfil, na abundância e no tempo de retenção, que podem indicar CQAs.

Os métodos analíticos reprodutíveis e robustos exigem validação completa, resultando em metodologias para fornecer percepções essenciais sobre proteínas bioterapêuticas, auxiliando na sua caracterização e avaliação de qualidade.

A detecção óptica (como UV) é frequentemente utilizada para monitorar peptídeos. Essa abordagem é considerada o padrão ouro para testes de identidade e qualidade em ambientes de GQ/CQ. Os peptídeos podem ser monitorados com base no perfil, na abundância e no tempo de retenção, que podem indicar CQAs.

Os métodos analíticos reprodutíveis e robustos exigem validação completa, resultando em metodologias para fornecer percepções essenciais sobre proteínas bioterapêuticas, auxiliando na sua caracterização e avaliação de qualidade.

Notas de aplicação

E-book: Mapeamento de peptídeos para bioterapêuticos

O mapeamento de peptídeos continua sendo um dos mais importantes ensaios ricos em informações que pode ser aplicado para a caracterização e o monitoramento de biofármacos. As soluções neste e-book — desde o preparo de amostras, automação, separação cromatográfica e identificação de massa — fornecem aos cientistas estratégias para ajudar a melhorar e simplificar a difícil tarefa do mapeamento de peptídeos. Por exemplo, inovações em digestões trípticas com a RapiZyme, uma tripsina recombinante metilada homogeneamente, permitem maior velocidade, fidelidade de digestão e baixos níveis de peptídeos derivados de tripsina por meio da sua resistência à autólise, pureza e alta atividade para oferecer mapas de peptídeos mais confiáveis e reprodutíveis.

O mapeamento de peptídeos continua sendo um dos mais importantes ensaios ricos em informações que pode ser aplicado para a caracterização e o monitoramento de biofármacos. As soluções neste e-book — desde o preparo de amostras, automação, separação cromatográfica e identificação de massa — fornecem aos cientistas estratégias para ajudar a melhorar e simplificar a difícil tarefa do mapeamento de peptídeos. Por exemplo, inovações em digestões trípticas com a RapiZyme, uma tripsina recombinante metilada homogeneamente, permitem maior velocidade, fidelidade de digestão e baixos níveis de peptídeos derivados de tripsina por meio da sua resistência à autólise, pureza e alta atividade para oferecer mapas de peptídeos mais confiáveis e reprodutíveis.

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Soluções

Os sistemas LC e LC-MS da Waters oferecem desempenho e sensibilidade de separações líderes para análise de mapeamento de peptídeos.

Caracterização e monitoramento eficientes de peptídeos durante todo o ciclo de vida dos produtos

Caracterização e monitoramento eficientes de peptídeos durante todo o ciclo de vida dos produtos

Sistema BioAccord LC-MS

Habilite análises biofarmacêuticas por LC-MS em cada laboratório de GxP com o Sistema Waters BioAccord LC-MS, que inclui MS de alta resolução e o software waters_connect para geração de relatórios e análise de dados prontos para conformidade.

Capacidade de alta resolução completa para caracterização e transferência confiáveis de métodos

Capacidade de alta resolução completa para caracterização e transferência confiáveis de métodos

Xevo G3 QTof

Acelere a caracterização e o monitoramento de vários atributos com o sistema de bancada HRMS de alto desempenho do Xevo G3 QTof, que fornece resultados qualitativos e quantitativos exatos.

Adsorção ultrabaixa para máxima sensibilidade e reprodutibilidade

Adsorção ultrabaixa para máxima sensibilidade e reprodutibilidade

Soluções MaxPeak Premier

Acabe com a imprevisibilidade das perdas de analitos devido a interações com metais, que podem ser especialmente acentuadas com moléculas biológicas, utilizando os sistemas e as colunas MaxPeak Premier.

Software baseado em aplicações que pode ser conectado em rede e pronto para conformidade para otimizar a geração de relatórios, o processamento e a aquisição de dados por LC-MS.

Otimize a análise e o processamento de dados

Otimize a análise e o processamento de dados

waters_connect para biofármacos

Acelere a jornada da análise de amostras até a tomada de decisões com o waters_connect para biofármacos, que oferece aplicativos e rotinas de trabalho dedicados para MAM, análise de massa intacta, confirmação de sequência e muito mais.

Simplifique a aquisição, o processamento e a geração de relatórios de dados

Simplifique a aquisição, o processamento e a geração de relatórios de dados

Software de aquisição e gerenciamento de dados cromatográficos (CDS) Empower

Equipe seu laboratório com o Software de aquisição e gerenciamento de dados cromatográficos (CDS, Chromatography Data System) Empower e obtenha um gerenciamento avançado de dados de laboratório para suas análises de impurezas, incluindo aquisição, processamento e geração de relatórios para equipamentos de cromatografia líquida.

Colunas e consumíveis que proporcionam desempenho de ponta para LC e LC-MS para mapeamento de peptídeos.

Maximize a sensibilidade enquanto minimiza a adsorção de metal de peptídeos desamidados ácidos

Maximize a sensibilidade enquanto minimiza a adsorção de metal de peptídeos desamidados ácidos

Colunas MaxPeak Premier para peptídeos

Obtenha recuperação e sensibilidade aprimoradas para peptídeos ácidos com as Colunas Waters ACQUITY, XSelect e XBridge Premier para peptídeos, que são testadas em lotes de CQ com o Padrão de digestão de citocromo c da Waters para aumentar a consistência do desempenho de coluna para coluna.

Obtenha uma digestão de proteínas rápida, limpa e completa.

Obtenha uma digestão de proteínas rápida, limpa e completa.

Tripsina RapiZyme de grau MS (Espectrometria de massas)

Obtenha digestões rápidas, limpas e completas de mAb em apenas 30 minutos com a Tripsina RapiZyme de grau MS (Espectrometria de massas), uma enzima resistente à autólise fortemente ativa que reduz a probabilidade da ocorrência de modificações artificiais durante o preparo das amostras antes da análise de LC-MS.

Otimize o preparo de amostra do mapeamento de peptídeos

Otimize o preparo de amostra do mapeamento de peptídeos

Kits de digestão tríptica de proteínas PeptideWorks

Obtenha mapas de peptídeos reprodutíveis e de alta eficiência em menos de 2,5 horas com os kits de digestão tríptica de proteínas PeptideWorks para rotinas de trabalho manuais ou automatizadas, que são quatro vezes mais rápidos do que os métodos caseiros comuns e proporcionam uma redução de 78% nas clivagens perdidas.

Compare e valide facilmente suas colunas para peptídeos

Compare e valide facilmente suas colunas para peptídeos

Padrões e kits de peptídeos

Verifique o desempenho das colunas e monitore suas condições ao longo da sua vida útil com os Padrões de peptídeos da Waters e execute suas separações de peptídeos em qualquer sistema de UPLC, HPLC, ou LC-MS utilizando padrões pré-embalados especificamente formulados para minimizar a perda e as discrepâncias das amostras.

Ganhe eficiência e tempo com soluções verificadas de automação laboratorial.

Melhore a eficiência e a produtividade no preparo da amostra

Melhore a eficiência e a produtividade no preparo da amostra

Equipamentos e automação de laboratório

Otimize o preparo de amostras para análises LC-MS com a automação e os equipamentos de laboratório da Waters, que oferecem rotinas de trabalho verificadas para ajudar a minimizar a variabilidade, melhorar a rastreabilidade e simplificar a transferência de métodos.

Seu sucesso em um clique

Seu sucesso em um clique

Serviços Globais Waters

Otimize a produtividade e o sucesso do seu laboratório com os Serviços Globais Waters para manter o desempenho máximo do sistema, minimizar o tempo de inatividade, enfrentar os desafios das aplicações e apoiar os rigorosos requisitos de conformidade.

Torne a ciência mais acessível com a Waters Capital

Torne a ciência mais acessível com a Waters Capital

Soluções de pagamento

Maximize recursos e minimize os riscos com as opções de pagamento da Waters Capital, incluindo atualização de equipamentos antigos, obtenção de suporte personalizado e agrupamento de serviços em um pagamento mensal.

Os dados falam por si

Comparação da área (%) do Sistema ACQUITY UPLC I-Class PLUS e do Sistema ACQUITY UPLC H-Class PLUS Bio Binary (com misturador de 340 µL e atraso de gradiente) em quatro injeções. Os dados indicam que a área do pico é preservada entre os sistemas.

A rotina de trabalho de mapeamento de peptídeos do Sistema BioAccord fornece identificações de PTM. A figura mostra o painel de revisão após o processamento automatizado de dados. A tabela de componentes contém: informações de sequência, massa m/z e neutra, tolerância de massa, % de abundância relativa, bem como informações de fragmentação para cada peptídeo. A tabela de resumo fornece uma visualização concisa das modificações de peptídeos selecionadas em todas as amostras. A consistência nos tempos de retenção é mostrada no painel inferior esquerdo, utilizando TICs para as injeções 1 e 25.

Sobreposição de TIC (cromatograma de íons totais) de injeções de Padrão de digesto tríptico de mAb com IDC desligado e IDC ativado com limiares de 5, 10 e 20. A tabela associada mostra o tamanho total do arquivo, a redução percentual e o tempo de processamento de dados com o UNIFI Scientific Information System.

Perfis de XIC demonstrando o efeito da química de superfície de partícula (BEH e sílica) em seletividades para peptídeos trípticos de mAb do NIST selecionados utilizando 0,1% de TFA (ácido trifluoroacético) em fases móveis de água/acetonitrila. Os cromatogramas foram alinhados com base no tempo de retenção do H38. Os valores de MW (Peso molecular) e pI (Ponto isoelétrico) para os peptídeos (Da) são fornecidos no inserto da tabela. As identidades de pico são fornecidas na Tabela 3.

Abundância relativa de clivagens perdidas e não específicas para digestos de NISTmAb preparados utilizando as rotinas de trabalho manuais e automatizadas do PeptideWorks e um kit de tripsina imobilizada líder. As barras de erro representam um desvio padrão. O PeptideWorks proporciona uma digestão mais completa e específica.

Digestões com relação enzima:proteína de 1:5 de Remicade, destacando a limpeza da linha de base com Tripsina RapiZyme (azul) em comparação com um concorrente líder do setor (preto). O eixo Y é a % de intensidade de TIC.

Webinars e recursos

Método de vários atributos (MAM) de peptídeos no Sistema BioAccord LC-MS habilitado para SmartMS

Rotinas de trabalho biofarmacêuticas de mapeamento de peptídeos aprimoradas utilizando uma nova enzima tripsina resistente à autólise

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Novo método automatizado para preparo de amostras para mapeamento de peptídeos

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Análise de peptídeos sintéticos

Garanta que os padrões de qualidade e de desenvolvimento de medicamentos sejam atendidos com as principais soluções da Waters para purificação, caracterização e monitoramento em escala de laboratório de peptídeos sintéticos, como o peptídeo semelhante ao glucagon 1 (GLP-1, Glucagon-Like Peptide).

Soluções para análise de proteínas intactas e de subunidades

Avalie a identidade, as glicoformas e as modificações de proteínas com técnicas de espectrometria de massas de subunidade e massa intacta nas soluções da Waters para compreender as estruturas das proteínas e avançar na pesquisa biofarmacêutica.

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Sistemas .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round} .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round}

Os sistemas LC e LC-MS da Waters oferecem desempenho e sensibilidade de separações líderes para análise de mapeamento de peptídeos.

Caracterização e monitoramento eficientes de peptídeos durante todo o ciclo de vida dos produtos

Capacidade de alta resolução completa para caracterização e transferência confiáveis de métodos

Adsorção ultrabaixa para máxima sensibilidade e reprodutibilidade

Software .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round} .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round}

Software baseado em aplicações que pode ser conectado em rede e pronto para conformidade para otimizar a geração de relatórios, o processamento e a aquisição de dados por LC-MS.

Otimize a análise e o processamento de dados

Simplifique a aquisição, o processamento e a geração de relatórios de dados

Colunas e consumíveis .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round} .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round}

Colunas e consumíveis que proporcionam desempenho de ponta para LC e LC-MS para mapeamento de peptídeos.

Maximize a sensibilidade enquanto minimiza a adsorção de metal de peptídeos desamidados ácidos

Obtenha uma digestão de proteínas rápida, limpa e completa.

Otimize o preparo de amostra do mapeamento de peptídeos

Compare e valide facilmente suas colunas para peptídeos

Automação laboratorial .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round} .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round}

Ganhe eficiência e tempo com soluções verificadas de automação laboratorial.

Melhore a eficiência e a produtividade no preparo da amostra

Serviços e suporte .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round} .st0{fill:none;stroke:#000;stroke-linecap:round;stroke-linejoin:round}

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