寡核苷酸反相色谱柱

寡核苷酸反相色谱柱

沃特世寡核苷酸反相色谱柱能够在寡核苷酸表征和杂质分析中发挥业内出色的pH和温度耐受性以及优异的分离度性能。每批吸附剂都使用寡核苷酸标准品进行了质量控制(QC)测试,以确保批次间性能和重现性。

沃特世寡核苷酸反相色谱柱能够在寡核苷酸表征和杂质分析中发挥业内出色的pH和温度耐受性以及优异的分离度性能。每批吸附剂都使用寡核苷酸标准品进行了质量控制(QC)测试,以确保批次间性能和重现性。


概述

离子对反相(IPRP)色谱是合成寡核苷酸表征和杂质分析的优选方法。相较于其他任何色谱技术(包括阴离子交换(AEX)、HILIC和SEC),该方法可以帮助科学家更好地分离合成与工艺相关杂质。但该技术的难度不容小觑。有多种因素可直接影响分离性能和重现性,包括离子对试剂的纯度和稳定性、对色谱硬件的非特异性吸附以及吸附剂的批次间差异。IPRP依赖于高pH和温度条件才能实现理想分离,因此,色谱柱材料必须能够耐受较高的pH和温度。

沃特世寡核苷酸反相色谱柱具有以下优势,可助您获得可靠结果:

  • 采用BEH C18杂化硅胶颗粒技术,具有业内出色的pH和温度稳定性,可发挥优异的分离度性能并延长色谱柱使用寿命。
  • 采用MaxPeak Premier高性能表面(HPS)技术,显著减少非特异性吸附(NSA),大幅提高灵敏度、重现性和分析生产率。
  • 使用寡核苷酸进行QC测试,确保批次间分离性能和重现性。


无需进行色谱柱活化操作,提升灵敏度和重现性

无需进行色谱柱活化操作,提升灵敏度和重现性

核酸(包括寡核苷酸)是聚阴离子分析物(带负电荷),容易吸附到不锈钢色谱柱中的金属氧化物表面。Waters MaxPeak Premier寡核苷酸分析专用柱采用惰性的有机/无机杂化硅胶基质表面填料,使核酸的NSA近乎消除,从而提高灵敏度、重现性和分析生产率。 沃特世可帮助您的实验室省去分析前耗时的色谱柱钝化和样品活化步骤。

为合成寡核苷酸提供出色的分离度

为合成寡核苷酸提供出色的分离度

合成寡核苷酸的IP-RP色谱分析根据大小、电荷和疏水性的细微变化来分离样品组分。Waters ACQUITY(UPLC:1.7 µm粒径)和XBridge(HPLC/UHPLC:2.5 µm粒径)Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱可为寡核苷酸样品提供出色的分离度、灵敏度和重现性。

超长的色谱柱使用寿命

超长的色谱柱使用寿命

Waters ACQUITY和XBridge Premier寡核苷酸分析专用柱填充Waters BEH(亚乙基桥杂化)C18杂化硅胶颗粒,即使在高pH和温度条件下也具有超长的色谱柱使用寿命,同时保持出色的分离性能。

解决方案


2.1 × 20 mm色谱柱实现超快速分离

2.1 × 20 mm色谱柱实现超快速分离

寡核苷酸和长链核酸表现出强烈的结合/解离以及洗脱机制,适用于“急速梯度”和超快速分离,从而提升高通量检测实验室的分析生产率。Waters ACQUITY Premier BEH C18 2.1 × 20 mm寡核苷酸分析专用柱有130 Å和300 Å两种孔径,分别能够实现短聚体(10~40 nt)和长聚体(>40 nt)的超快速分离。

  • Ultrafast Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

MaxPeak Premier大孔径(300 Å)色谱柱适用于长聚体寡核苷酸分析

MaxPeak Premier大孔径(300 Å)色谱柱适用于长聚体寡核苷酸分析

ACQUITY (1.7 µm)和XBridge (2.5 µm) Premier寡核苷酸分析专用柱均提供130 Å和300 Å两种孔径,根据寡核苷酸的长度不同,这些色谱柱在保留性和峰的尖锐程度方面存在差异。130 Å孔径颗粒的表面积更大,能够改善短聚体寡核苷酸(<约40 mer)的保留性和分离度,而300 Å孔径颗粒则有助于改善较长链寡核苷酸(>约40 mer)的扩散和分离度。

  • Long-mer Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

用于性能基准测试的寡核苷酸/核酸标准品

用于性能基准测试的寡核苷酸/核酸标准品

沃特世提供一系列具有批次可溯源性的高质量分析标准品,与寡核苷酸反相色谱柱相辅相成,助力系统适应性测试、方法开发和故障诊断排除。其中包括Waters MassPREP寡核苷酸标准品(含15-35 mer oligodT标准品)— 用于QC验证所有沃特世寡核苷酸品牌色谱柱、20 mer ssDNA标准品 — 用于LC-MS/MS碎片分析和序列分析的性能基准测试、脂质偶联重链修饰的反义寡核苷酸(ASO)、ssDNA和dsDNA标准品等。

  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

VanGuard FIT色谱柱有助于延长色谱柱使用寿命

VanGuard FIT色谱柱有助于延长色谱柱使用寿命

所有ACQUITY和XBridge Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱均提供VanGuard FIT色谱柱形式,包括完全一体化的5 mm保护柱柱芯,其中填充相同的吸附剂,可用作保护柱,防止分析柱受到污染。完全一体化的设计不会影响样品分离度。如果出现污染,可以轻松更换柱芯,从而延长分析柱的使用寿命。

  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

应用

沃特世已经发表30多篇应用纪要,在治疗和诊断领域将沃特世前沿的液相色谱和质谱工具用于寡核苷酸表征和杂质分析。以下近期的示例展现了我们深厚的应用专业知识以及新颖、先进的工具。

沃特世已经发表30多篇应用纪要,在治疗和诊断领域将沃特世前沿的液相色谱和质谱工具用于寡核苷酸表征和杂质分析。以下近期的示例展现了我们深厚的应用专业知识以及新颖、先进的工具。


应用纪要

应用纪要

作为一种双链RNA,小分子干扰RNA (siRNA)寡核苷酸治疗药物具有特有的分析挑战。以下应用纪要介绍非变性和变性色谱分离方法。

作为一种双链RNA,小分子干扰RNA (siRNA)寡核苷酸治疗药物具有特有的分析挑战。以下应用纪要介绍非变性和变性色谱分离方法。


应用纪要

应用纪要

诊断用寡核苷酸和治疗性寡核苷酸的核苷酸序列对其特异性和功能具有重要作用。因此,必须准确确认其序列。LC-MS工作流程能够百分百确认寡核苷酸的序列,并具有独特的能力,能够鉴定序列中的修饰核苷酸并确认位置,无论是合成寡核苷酸还是长链核酸的核酸酶酶解物所生成的寡核苷酸均适用(例如,mRNA或ssDNA寡核苷酸图谱分析工作流程)。

诊断用寡核苷酸和治疗性寡核苷酸的核苷酸序列对其特异性和功能具有重要作用。因此,必须准确确认其序列。LC-MS工作流程能够百分百确认寡核苷酸的序列,并具有独特的能力,能够鉴定序列中的修饰核苷酸并确认位置,无论是合成寡核苷酸还是长链核酸的核酸酶酶解物所生成的寡核苷酸均适用(例如,mRNA或ssDNA寡核苷酸图谱分析工作流程)。


应用纪要

应用纪要

mRNA类治疗药物和疫苗的关键质量属性包括确认polyA尾的长度和多分散性,以及鉴定5'端帽和任何可能存在的低水平异构体。以下应用纪要展示离子对反相色谱分析。

mRNA类治疗药物和疫苗的关键质量属性包括确认polyA尾的长度和多分散性,以及鉴定5'端帽和任何可能存在的低水平异构体。以下应用纪要展示离子对反相色谱分析。


应用纪要

应用纪要

在药物开发中,从早期发现到后期开发,经过充分纯化的寡核苷酸材料都是必需品,以促进一系列不同的研究和改进纯化方案。本应用纪要提出了一种经济有效、高通量的系统化方法,用于20 mer寡核苷酸的分析级分离和制备级纯化。

在药物开发中,从早期发现到后期开发,经过充分纯化的寡核苷酸材料都是必需品,以促进一系列不同的研究和改进纯化方案。本应用纪要提出了一种经济有效、高通量的系统化方法,用于20 mer寡核苷酸的分析级分离和制备级纯化。


应用纪要

应用纪要


数据说明一切

数据说明一切
使用ACQUITY Premier BEH C18, 300 Å寡核苷酸分析专用柱连续四次进样3 µL双链体C (0.40 mg/mL)得到的结果。
25 mg纯化运行的馏分纯度测定结果。
以点图形式呈现的100%序列覆盖率,通过高能量MSE非靶向碎裂产生。
使用ACQUITY Premier 2.1×20 mm寡核苷酸分析专用超短柱,在F = 1.5 mL/min,T = 70 °C的条件下运行1.33 min内凹(对数)梯度观察到的实验色谱图。

网络研讨会和资源


  • 指南

用于生物分离的LC和LC-MS化学消耗品 – 挂图

用于生物分离的LC和LC-MS化学消耗品 – 挂图
  • 信息图表

ACQUITY Premier寡核苷酸分析专用柱 – 信息图表

ACQUITY Premier寡核苷酸分析专用柱 – 信息图表
  • User Manuals

ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱维护和使用手册

ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱维护和使用手册
  • User Manuals

寡核苷酸分离技术标准品维护和使用手册

寡核苷酸分离技术标准品维护和使用手册
  • 电子书

寡核苷酸纯化产

寡核苷酸纯化产
  • 电子书

寡核苷酸定量产

寡核苷酸定量产

相关信息

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详细了解寡核苷酸反相色谱柱。

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