离子对反相(IPRP)色谱是合成寡核苷酸表征和杂质分析的优选方法。相较于其他任何色谱技术(包括阴离子交换(AEX)、HILIC和SEC),该方法可以帮助科学家更好地分离合成与工艺相关杂质。但该技术的难度不容小觑。有多种因素可直接影响分离性能和重现性,包括离子对试剂的纯度和稳定性、对色谱硬件的非特异性吸附以及吸附剂的批次间差异。IPRP依赖于高pH和温度条件才能实现理想分离,因此,色谱柱材料必须能够耐受较高的pH和温度。
沃特世寡核苷酸反相色谱柱具有以下优势,可助您获得可靠结果:
核酸(包括寡核苷酸)是聚阴离子分析物(带负电荷),容易吸附到不锈钢色谱柱中的金属氧化物表面。Waters MaxPeak Premier寡核苷酸分析专用柱采用惰性的有机/无机杂化硅胶基质表面填料,使核酸的NSA近乎消除,从而提高灵敏度、重现性和分析生产率。 沃特世可帮助您的实验室省去分析前耗时的色谱柱钝化和样品活化步骤。
合成寡核苷酸的IP-RP色谱分析根据大小、电荷和疏水性的细微变化来分离样品组分。Waters ACQUITY(UPLC:1.7 µm粒径)和XBridge(HPLC/UHPLC:2.5 µm粒径)Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱可为寡核苷酸样品提供出色的分离度、灵敏度和重现性。
Waters ACQUITY和XBridge Premier寡核苷酸分析专用柱填充Waters BEH(亚乙基桥杂化)C18杂化硅胶颗粒,即使在高pH和温度条件下也具有超长的色谱柱使用寿命,同时保持出色的分离性能。
沃特世提供一系列具有批次可溯源性的高质量分析标准品,与寡核苷酸反相色谱柱相辅相成,助力系统适应性测试、方法开发和故障诊断排除。其中包括Waters MassPREP寡核苷酸标准品(含15-35 mer oligodT标准品)— 用于QC验证所有沃特世寡核苷酸品牌色谱柱、20 mer ssDNA标准品 — 用于LC-MS/MS碎片分析和序列分析的性能基准测试、脂质偶联重链修饰的反义寡核苷酸(ASO)、ssDNA和dsDNA标准品等。
所有ACQUITY和XBridge Premier BEH C18寡核苷酸分析专用柱均提供VanGuard FIT色谱柱形式,包括完全一体化的5 mm保护柱柱芯,其中填充相同的吸附剂,可用作保护柱,防止分析柱受到污染。完全一体化的设计不会影响样品分离度。如果出现污染,可以轻松更换柱芯,从而延长分析柱的使用寿命。