La cromatografía de fase reversa con par iónico (IPRP) es el método de elección para la caracterización de oligonucleótidos sintéticos y el análisis de impurezas. El método ayuda a los científicos a resolver las impurezas relacionadas con la síntesis y el proceso mejor que cualquier otra técnica cromatográfica, incluido el intercambio aniónico (AEX), HILIC y SEC. La técnica no está exenta de problemas. Varios factores pueden afectar directamente al rendimiento y la reproducibilidad de la separación, como la pureza y la estabilidad de los reactivos de par iónico, la adsorción inespecífica en el hardware cromatográfico y las variaciones entre lotes en el sorbente. IPRP se basa en condiciones de pH y temperatura elevados para lograr separaciones óptimas, lo que requiere que los materiales de la columna tengan una tolerancia elevada al pH y a la temperatura.
Gane confianza en los resultados con las columnas de fase reversa para oligonucleótidos de Waters, que ofrecen:
Los ácidos nucleicos, incluidos los oligonucleótidos, son polianiónicos (carga negativa) y se adsorben fácilmente en las superficies de óxidos metálicos de las columnas de acero inoxidable. Las columnas para oligonucleótidos MaxPeak Premier de Waters tienen una química de superficie híbrida inerte orgánica/inorgánica basada en sílice que casi elimina la NSA de los ácidos nucleicos, lo que permite mejorar la sensibilidad, la reproducibilidad y la productividad. Con Waters, el laboratorio puede eliminar los tediosos pasos de pasivación de la columna y acondicionamiento de las muestras antes del análisis.
La cromatografía IP-RP de oligonucleótidos sintéticos resuelve los componentes de las muestras en función de cambios menores en el tamaño, la carga y la hidrofobicidad. Las columnas ACQUITY (UPLC: tamaño de partícula de 1,7 µm ) y XBridge (HPLC/UHPLC: tamaño de partícula de 2,5 µm ) Premier Oligonucleotide BEH C18 de Waters ofrecen una resolución, sensibilidad y reproducibilidad excepcionales de las muestras de oligonucleótidos.
Las columnas ACQUITY and XBridge Premier Oligonucleotide de Waters se rellenan con partículas de sílice híbridas con puentes de etileno (BEH) C18 de Waters y muestran una notable longevidad de la columna en condiciones de pH y temperatura elevados, a la vez que mantienen un rendimiento de separación excepcional.
Waters ofrece una gama de patrones analíticos de alta calidad con trazabilidad de lotes que complementan nuestras columnas de fase reversa de oligonucleótidos para facilitar las pruebas de idoneidad del sistema, el desarrollo de métodos y la resolución de problemas. Estos incluyen el patrón de oligonucleótidos MassPREP de Waters que contiene un secuencia de oligodT de 15-35 mer para verificar el control de calidad (QC) de todas las columnas de oligonucleótidos de marca de Waters, un patrón de ssDNA de 20 mer para la evaluación comparativa de la fragmentación LC-MS/MS y el análisis de secuencias, un oligonucleótido antisentido (ASO) muy modificado y conjugado con lípidos, secuencias ssDNA y dsDNA, y más.
Todas las columnas ACQUITY y XBridge Premier Oligonucleotide BEH C18 están disponibles en el formato de columna VanGuard FIT, que incluye un cartucho precolumna de 5 mm completamente integrado lleno del mismo sorbente y actúa como protección para evitar la contaminación de la columna analítica. El diseño totalmente integrado no tiene ningún impacto en la resolución de la muestra. El cartucho se puede sustituir fácilmente en caso de suciedad, lo que prolonga la vida útil de la columna analítica.