ペプチドマッピング

ペプチドマッピング

ウォーターズのペプチドマッピングソリューションを使用して、タンパク質の同定、安定性、修飾に関して有用な情報が得られます。ウォーターズの目的に適合させたシステムソリューションは、分析法、使いやすさ、文書化、アプリケーションのサポートにより、サンプル前処理、カラム、自動化、装置、ソフトウェアが統合されており、これによって、複雑なタンパク質および糖タンパク質消化物のより良好な分離をよりハイスループットに得ることができます。

ウォーターズのペプチドマッピングソリューションを使用して、タンパク質の同定、安定性、修飾に関して有用な情報が得られます。ウォーターズの目的に適合させたシステムソリューションは、分析法、使いやすさ、文書化、アプリケーションのサポートにより、サンプル前処理、カラム、自動化、装置、ソフトウェアが統合されており、これによって、複雑なタンパク質および糖タンパク質消化物のより良好な分離をよりハイスループットに得ることができます。

青色のペプチドの分子構造
Peptide molecular structure in blue

概要

ペプチドマッピングは、バイオ医薬品の包括的な特性解析およびモニタリングに不可欠です。各消化フラグメントを確実に分離するのに十分なクロマトグラフィー分離を得るには、優れたクロマトグラフィー性能を備えた、頑健で再現性のある分析法が必要です。

ウォーターズのペプチドマッピングソリューションにより、自動化、サンプル前処理、クロマトグラフィー分離、質量分析、包括的ソフトウェアワークフローを組み合わせて、複雑なタンパク質および糖タンパク質消化物をハイスループットで分析することができます。ウォーターズの定性・定量分析ソリューションは、ルーチンラボにおける効果的な特性解析、簡単な分析法移管、コンプライアンス対応のモニタリングをサポートします。ウォーターズの堅牢で頑健なペプチドマッピングワークフローを使用することで、研究開発の目標を達成することができます。


アプリケーション

ペプチドマッピング特性解析は、モノクローナル抗体(mAb)や抗体薬物複合体(ADC)などのタンパク質のアミノ酸一次構造および品質特性を解析するのに不可欠です。

タンパク質消化によって生じるそれぞれのペプチドにより、配列情報、保持時間、強度が得られ、全体のタンパク質配列を確認することができます。ウォーターズは、複雑な消化物混合物を理解し、ルーチンラボへの移管に適した分析法を開発するための、強力な質量分析ハードウェアおよびソフトウェアワークフローを提供しています。

ペプチドマッピング特性解析は、モノクローナル抗体(mAb)や抗体薬物複合体(ADC)などのタンパク質のアミノ酸一次構造および品質特性を解析するのに不可欠です。

タンパク質消化によって生じるそれぞれのペプチドにより、配列情報、保持時間、強度が得られ、全体のタンパク質配列を確認することができます。ウォーターズは、複雑な消化物混合物を理解し、ルーチンラボへの移管に適した分析法を開発するための、強力な質量分析ハードウェアおよびソフトウェアワークフローを提供しています。



アプリケーションノート

アプリケーションノート

LC-MS によるペプチド特性モニタリングは、バイオ医薬品の品質と安全性の確保において重要な役割を果たしており、規制当局は、目的の製品構造を有することを確認し、開発時に、ロットリリースの目的で、プロセスの理解を実証することを求めています。

この手法は、マルチ特性分析(MAM)などの分野にまで拡張して採用されており、これによって、単一の分析で複数の製品品質特性(PQA)と重要品質特性(CQA)をモニターすることができます。また、酸化、脱アミド化、スクシンイミド修飾、グリコシル化、C 末端および N 末端の修飾、異性化などによる未知の不純物や修飾を検出することもできます。

LC-MS によるペプチド特性モニタリングは、バイオ医薬品の品質と安全性の確保において重要な役割を果たしており、規制当局は、目的の製品構造を有することを確認し、開発時に、ロットリリースの目的で、プロセスの理解を実証することを求めています。

この手法は、マルチ特性分析(MAM)などの分野にまで拡張して採用されており、これによって、単一の分析で複数の製品品質特性(PQA)と重要品質特性(CQA)をモニターすることができます。また、酸化、脱アミド化、スクシンイミド修飾、グリコシル化、C 末端および N 末端の修飾、異性化などによる未知の不純物や修飾を検出することもできます。



アプリケーションノート

アプリケーションノート

ペプチドのモニタリングには、光学検出器(UV など)がよく使用されます。このアプローチは、QA/QC 環境でのアイデンティティーおよび品質の試験のゴールドスタンダードと考えられています。ペプチドは、CQA である可能性がある、プロファイル、存在量、保持時間に基づいてモニターすることができます。

完全なバリデーションにより、再現性のある頑健な分析法が確立され、その分析法によってバイオ医薬品タンパク質に関する重要な情報が得られて、その特性解析および品質評価に役立ちます。

ペプチドのモニタリングには、光学検出器(UV など)がよく使用されます。このアプローチは、QA/QC 環境でのアイデンティティーおよび品質の試験のゴールドスタンダードと考えられています。ペプチドは、CQA である可能性がある、プロファイル、存在量、保持時間に基づいてモニターすることができます。

完全なバリデーションにより、再現性のある頑健な分析法が確立され、その分析法によってバイオ医薬品タンパク質に関する重要な情報が得られて、その特性解析および品質評価に役立ちます。



アプリケーションノート

アプリケーションノート


eBook:バイオ医薬品のためのペプチドマッピング

ペプチドマッピングは依然として、バイオ医薬品の特性解析およびモニタリングに適用されている、最も重要でデータが豊富に得られる分析の 1 つです。サンプル前処理から自動化、クロマトグラフィー分離、質量同定まで、この eBook で取り上げているソリューションは、ペプチドマッピングという困難なタスクを改善し簡素化するのに役立つ戦略を科学者に提供します。例えば、均一にメチル化された組換えトリプシンである RapiZyme トリプシンを用いたトリプシン消化というイノベーションでは、その自己消化耐性、純度、高活性により、速度と消化の忠実度が向上し、トリプシン由来のペプチドが低レベルになるため、より信頼性が高く再現性のあるペプチドマッピングが可能になります。

ペプチドマッピングは依然として、バイオ医薬品の特性解析およびモニタリングに適用されている、最も重要でデータが豊富に得られる分析の 1 つです。サンプル前処理から自動化、クロマトグラフィー分離、質量同定まで、この eBook で取り上げているソリューションは、ペプチドマッピングという困難なタスクを改善し簡素化するのに役立つ戦略を科学者に提供します。例えば、均一にメチル化された組換えトリプシンである RapiZyme トリプシンを用いたトリプシン消化というイノベーションでは、その自己消化耐性、純度、高活性により、速度と消化の忠実度が向上し、トリプシン由来のペプチドが低レベルになるため、より信頼性が高く再現性のあるペプチドマッピングが可能になります。


ソリューション


ウォーターズの LC システムおよび LC-MS システムは、ペプチドマッピングにおいて、業界をリードする分離性能と感度を提供します。

ウォーターズの LC システムおよび LC-MS システムは、ペプチドマッピングにおいて、業界をリードする分離性能と感度を提供します。

製品のライフサイクルにわたる効率的なペプチドの特性解析およびモニタリング

製品のライフサイクルにわたる効率的なペプチドの特性解析およびモニタリング

高分解能 MS、およびコンプライアンス対応のデータ分析およびレポート作成用の waters_connect ソフトウェアを含む Waters BioAccord LC-MS システムを使用することで、すべての GxP ラボにおいてバイオ医薬品の LC-MS 分析を行えるようになります。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

確実な特性解析および分析法移管のための完全な高分解能機能

確実な特性解析および分析法移管のための完全な高分解能機能

正確な定性結果および定量結果が得られる、Xevo G3 QTof 高性能 HRMS ベンチトップ型システムを使用することで、マルチ特性の特性解析を加速することができます。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

超低吸着性による最大の感度と再現性

超低吸着性による最大の感度と再現性

MaxPeak Premier カラムおよびシステムを使用することで、生体分子で特に顕著になることがある、金属への吸着による予測できない分析種の喪失が解消します。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

LC-MS データの取り込み、解析、レポート作成を合理化できる、コンプライアンス対応でネットワーク対応のアプリケーションベースのソフトウェア。

LC-MS データの取り込み、解析、レポート作成を合理化できる、コンプライアンス対応でネットワーク対応のアプリケーションベースのソフトウェア。

データの分析と解析の合理化

データの分析と解析の合理化

MAM、インタクト質量分析、配列確認などに向けて開発された専用アプリとワークフローを備えたバイオ医薬品のための waters_connect を活用して、サンプル分析から意志決定までの過程を加速させます。

  • Peptide MAM
  • Intact and Subunit MAM
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

データ取り込み、解析、レポート作成の簡素化

データ取り込み、解析、レポート作成の簡素化

Empower クロマトグラフィーデータシステム(CDS)をラボに装備することで、液体クロマトグラフィー装置における取り込み、解析、レポート作成を含め、不純物分析のための高度なラボデータ管理が行えるようになります。

  • Peptide Mapping with Optical Detection

ペプチドマッピング向けの最先端の LC 性能および LC-MS 性能が得られるカラムおよび消耗品

ペプチドマッピング向けの最先端の LC 性能および LC-MS 性能が得られるカラムおよび消耗品

酸性脱アミド化ペプチドの金属への吸着を最小限に抑えつつ、感度を最大化

酸性脱アミド化ペプチドの金属への吸着を最小限に抑えつつ、感度を最大化

Waters Cytochrome c 消化物標準試料を用いて QC バッチ試験を行うことにより、カラム間の性能の高い一貫性が保証される Waters ACQUITY、XSelect、XBridge Premier Peptide カラムを使用して、酸性ペプチドの回収率と感度を向上させます。

  • Reversed-Phase Peptide Columns
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

迅速かつクリーンで、完全なタンパク質消化を達成

迅速かつクリーンで、完全なタンパク質消化を達成

LC-MS 分析前のサンプル前処理中に人為的な修飾が起きる可能性を低減する、非常に活性の高い自己消化耐性のある酵素である RapiZyme トリプシン(質量分析(MS)グレード)により、わずか 30 分で、迅速かつクリーンで、完全なモノクローナル抗体(mAb)の消化を行うことができます。

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

ペプチドマッピングにおけるサンプル前処理の合理化

ペプチドマッピングにおけるサンプル前処理の合理化

手動ワークフローまたは自動ワークフロー用の PeptideWorks トリプシンタンパク質消化キットを使用することで、2.5 時間以内に高効率で再現性のあるペプチドマッピングを行うことができ、これにより、平均的な内製メソッドと比較して 4 倍速くなり、非特異的切断を 78% 減らすことができます。

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

ペプチドカラムの性能評価とバリデーションを容易に

ペプチドカラムの性能評価とバリデーションを容易に

Waters ペプチド標準試料を使用して、カラム寿命にわたってカラム性能を確認し、カラムの状態をモニターします。また、特別に配合され、パッケージ化された標準試料を使用して、任意の UPLC システム、HPLC システム、LC-MS システムでペプチド分離を行うことで、サンプルの損失と不一致を最小限に抑えます。

  • Peptide Standards
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

検証済みのラボオートメーションソリューションを使用することで、効率が向上し、操作不要の時間が増えます。

検証済みのラボオートメーションソリューションを使用することで、効率が向上し、操作不要の時間が増えます。

サンプル前処理の効率およびスループットの向上

サンプル前処理の効率およびスループットの向上

検証済みのワークフローを提供して、ばらつきを最小限に抑え、トレーサビリティーを改善するとともに、分析法移管を簡素化できるウォーターズのラボオートメーションおよび装置を使用して、LC-MS 分析のサンプル前処理を効率化します。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

成功まであとワンクリック

成功まであとワンクリック

Waters グローバルサービスを使用してラボの生産性と成功を最適化することで、最高のシステム性能を維持し、ダウンタイムを最小限に抑え、アプリケーションの課題に対処して、厳格なコンプライアンス要件に対応することができます。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Waters Capital で科学へのアクセスを促進

Waters Capital で科学へのアクセスを促進

Waters Capital の支払いオプションを使用することで、リソースを最大化し、リスクを最小化することができます。これには、陳腐化した装置のアップグレード、カスタマイズされたサポートの利用、サービスを月 1 回の支払いにまとめるなどが含まれます。

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

データがすべてを語る

データがすべてを語る
ACQUITY UPLC I-Class PLUS システムと ACQUITY UPLC H-Class PLUS バイオバイナリーシステム(340 µL ミキサーおよびグラジエント遅延を使用)の 4 回の注入にわたる面積(%)の比較データからは、ピーク面積がシステム間で一致していることが示されています。
BioAccord システムのペプチドマッピングワークフローにより、PTM を同定することができます。図は、自動データ解析後のレビューパネルを示します。成分テーブルには、各ペプチドの配列情報、m/z およびニュートラル質量、質量許容範囲、% 相対存在量およびフラグメンテーション情報が記載されています。サマリーテーブルには、選択したペプチド修飾がすべてのサンプルにわたって簡潔にまとめられています。左下のパネルの注入 1 および 25 の TIC から、保持時間が一貫していることがわかります。
IDC オフ、および IDC をしきい値 5、10、20 で有効にした状態での、モノクローナル抗体(mAb)トリプシン消化標準品の注入で得られた IC 重ね描き。関連する表に、UNIFI 科学情報システムでの合計ファイルサイズ、減少割合、データ解析時間が示されています。
0.1% TFA 含有水/アセトニトリル移動相中を使用した場合に、粒子表面ケミストリー(BEH およびシリカ)が、特定の NIST モノクローナル抗体(mAb)トリプシン消化ペプチドの選択性に及ぼす影響を実証している XIC プロファイル。クロマトグラムは、H38 の保持時間に基づいてアライメントされています。ペプチド(Da)の分子量および pI の値を表の挿入図に示しています。表 3 にピークのアイデンティティーを示します。
手動および自動の PeptideWorks ワークフローに基づいて、主流の固定化トリプシンキットを使用して前処理した NISTmAb 消化物の、切れ残りおよび非特異的切断の相対的存在量。エラーバーは 1 標準偏差を表します。PeptideWorks により、より完全で特異的な消化が実現します。
酵素:タンパク質比 1:5 でのレミケードの消化。業界をリードする他社製トリプシン(黒色)の場合と比較して、RapiZyme トリプシン(青色)を用いた場合よりクリーンなベースラインが得られることが強調されています。Y 軸は TIC 強度(%)です。

Webinar およびリソース


SmartMS を搭載した BioAccord LC-MS システムでのペプチドのマルチ特性分析(MAM)
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バイオ医薬品のペプチドマッピング

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タンパク質消化がインテリジェントに

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RapiZyme、迅速・クリーン・完全

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  • インフォグラフィック

RapiZyme、柔軟性の高い使用

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新規の自己消化耐性トリプシン酵素を用いたバイオ医薬品ペプチドマッピングのワークフローの改善

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ペプチドマッピングのためのサンプル前処理用の新規自動メソッド

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関連情報

マルチ特性分析(MAM)による特性解析およびルーチンモニタリングのための、ウォーターズの包括的な LC-MS ワークフローおよび MS ワークフローを活用することで、バイオ医薬品およびワクチン製剤のバイオアナリシスに関する理解を深めます。

グルカゴン様ペプチド 1(GLP-1)の精製、特性解析、モニタリングなどのラボスケールの合成ペプチド用のウォーターズの卓越したソリューションを利用して、品質基準を満たした医薬品を開発することを確保します。

ウォーターズソリューションのインタクト質量・サブユニット質量分析手法を使用して、タンパク質のアイデンティティー、グリコフォーム、修飾を評価し、タンパク質の構造を理解して、バイオ医薬品の研究を進めます。

ペプチドマッピングソリューションの詳細情報はこちらから。

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青色のペプチドの分子構造
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